VEGF-B在人绒毛膜癌侵袭转移中作用的研究

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【目的】(1)检测血管内皮生长因子-B(vascular endothelial growthfactor-B,VEGF-B)在人绒毛膜癌不同侵袭力细胞JEG-3和JAR内表达,探讨VEGF-B高表达与绒毛膜癌侵袭转移的关系;(2)了解RNA干扰沉默VEGF-B基因对绒毛膜癌高侵袭力JEG-3细胞侵袭力的抑制作用。【方法】(1)运用半定量逆转录一聚合酶链反应(reverse transcriptase—polymerase chain reaction,RT-PCR)检测绒毛膜癌细胞JEG-3和JAR中VEGF-B mRNA的表达情况,Matrigel体外侵袭实验检测两种细胞侵袭能力,并比较差异;②构建VEGF-B特异shRNA(short hairpinRNA,小发夹RNA),并转染入高侵袭力JEG-3细胞;③检测转染前后VEGF-B mRNA表达的差异,并比较该细胞体外侵袭力的变化。【结果】(1)在两种细胞中均检测到VEGF-B mRNA表达,相对低侵袭性JAR细胞,高侵袭性JEG-3细胞中VEGF-B mRNA表达明显增加(P<0.05),相关性分析显示VEGF-B mRNA的表达水平与绒毛膜癌细胞侵袭力呈正相关(r=0.782,P<0.05);(2)转染后JEG-3细胞内VEGF-B mRNA的表达下降(P<0.05);(3)与阴性对照组、空白组相比,转染后JEG-3细胞的体外侵袭力亦下降(P<0.05)。【结论】(1)VEGF-B参与绒毛膜癌的发生和发展,除了跟VEGF家族其他成员一样,促进肿瘤血管新生外,还与绒毛膜癌的侵袭和转移有关;(2)VEGF-B shRNA的成功转染,有效抑制了目的基因VEGF-B在JEG-3细胞中的表达;(3)抑制VEGF-B mRNA的表达,可以减低JEG-3细胞的侵袭力。
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