论文部分内容阅读
目的:喉癌是耳鼻咽喉-头颈外科常见的恶性肿瘤之一。喉癌的发生、发展与其它恶性肿瘤一样,可能与多因素引起相关基因表达水平的改变有关。伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)是一种新型基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂和肿瘤抑制基因,可在转录后水平抑制多种MMP的表达,对抑制肿瘤的侵袭、生长、转移和血管生成有重要意义。编码第二人表皮生长因子受体癌基因(HER-2/neu),在细胞信号转导中发挥重要作用,调节细胞的生长、分化,可诱导RECK的下调来促进肿瘤细胞的生长、侵袭等。血管内皮生长因子(VEGF)是诱导肿瘤血管发生的重要调节因素,RECK对肿瘤血管的形成及肿瘤细胞生物学行为均有重要影响。本课题通过研究RECK、HER-2/neu和VEGF在喉癌组织的表达情况及其意义,从而探讨其与喉癌发生发展的关系。方法:1应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)S-P法检测40例喉癌组织、30例癌旁组织和14例正常喉粘膜组织中RECK、HER-2/neu和VEGF的表达情况。2应用流式细胞术(Flow Cytometrye,FCM)的方法定量检测40例喉癌组织、30例癌旁组织和14例正常喉粘膜组织中RECK、HER-2/neu和VEGF的蛋白含量。3运用统计软件SPSS13.0对数据进行统计分析。以P≤0.05为差异在统计学上有显著性意义,P≤0.01为差异在统计学上有非常显著性意义。结果:1 RECK的表达1.1免疫组化法:应用S-P法检测喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中RECK的表达强度呈上升趋势,三组相比有显著性差异(P<0.01)。进一步两两比较,喉癌组RECK的表达低于癌旁组与正常喉粘膜组(P<0.01,P<0.01),而癌旁组与正常喉粘膜组相比无显著性差异(P>0.05)。在喉癌组织中,RECK的表达与淋巴结转移(P<0.01)、临床分期(P<0.01)及病理分级(P<0.05)有关;与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关(P>0.05)。1.2流式细胞术:检测RECK在喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中的表达量(FI值)分别为0.8682±0.2935、1.0472±0.1756、1.1550±0.1714,三组相比有显著性差异(P<0.01)。喉癌组织中RECK的表达量明显低于癌旁组织(P<0.01)及正常喉粘膜组织(P<0.01),而癌旁组织与正常喉粘膜组织相比无显著性差异(P>0.05)。在喉癌组织中,RECK的表达与淋巴结转移(P<0.01)、临床分期(P<0.01)及病理分级(P<0.05)有关。2 HER-2/neu的表达2.1免疫组化法:应用S-P法检测喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中HER-2/neu的表达强度呈下降趋势,三组相比有显著性差异(P <0.01)。进一步两两比较,喉癌组HER-2/neu的表达均高于癌旁组与正常喉粘膜组(P<0.01,P<0.01),而癌旁组与正常喉粘膜组相比无显著性差异(P>0.05)。在喉癌组织中,HER-2/neu的表达与淋巴结转移(P<0.05)、临床分期(P<0.01)及病理分级(P<0.01)有关;与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关(P>0.05)。2.2流式细胞术:检测HER-2/neu在喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中的表达量(FI值)分别为1.5429±0.3812、1.1213±0.2432、1.0379±0.1760,三组相比有显著性差异(P<0.01)。喉癌组织中HER-2/neu的表达量明显高于癌旁组织(P<0.01)及正常喉粘膜组织(P<0.01),而癌旁组织与正常喉粘膜组织相比无显著性差异(P >0.05)。在喉癌组织中,HER-2/neu的表达与淋巴结转移(P<0.05)、临床分期(P<0.01)及病理分级(P<0.01)有关。3 VEGF的表达3.1免疫组化法:应用S-P法检测喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中VEGF的表达强度呈下降趋势,三组相比有显著性差异(P<0.01)。进一步两两比较,喉癌组VEGF的表达均高于癌旁组与正常喉粘膜组(P<0.01,P<0.05),而癌旁组与正常喉粘膜组相比无显著性差异(P>0.05)。在喉癌组织中,VEGF的表达与淋巴结转移(P<0.05)、临床分期(P<0.01)及病理分级(P<0.01)有关;与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关(P>0.05)。3.2流式细胞术:检测VEGF在喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中的表达量(FI值)分别为2.1948±0.6070、1.2663±0.5910、1.0336±0.2813,三组相比有显著性差异(P<0.01)。喉癌组织中VEGF的表达量明显高于癌旁组织(P<0.01)及正常喉粘膜组织(P<0.05),而癌旁组织与正常喉粘膜组织相比无显著性差异(P>0.05)。在喉癌组织中,VEGF的表达与淋巴结转移(P<0.05)、临床分期(P<0.01)及病理分级(P<0.01)有关。4喉癌组织中RECK蛋白表达量(FI值)与HER-2/neu蛋白表达量(FI值)呈直线负相关,直线回归方程Y=2.053-0.581X(r=-0.752,P =0.000)。5喉癌组织中RECK蛋白表达量(FI值)与VEGF蛋白表达量(FI值)呈直线负相关,直线回归方程Y=2.656-0.528X(r=-0.805,P =0.000)。6喉癌组织中HER-2/neu蛋白表达量(FI值)与VEGF蛋白表达量(FI值)呈直线正相关,直线回归方程Y=1.301+0.563X(r=0.610,P =0.000)。结论:1 RECK、HER-2/neu和VEGF在喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中均有表达。2 RECK在喉癌组织中的定量及定性表达均明显低于癌旁组织及正常喉粘膜组织,可能与喉癌的发生有关。3 HER-2/neu和VEGF在喉癌组织中的定量及定性表达均明显高于癌旁组织及正常喉粘膜组织,可能与喉癌的发生有关。4 RECK、HER-2/neu和VEGF在喉癌组织中的表达与淋巴结转移、临床分期、病理分级有相关性;与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关。提示其可能与喉癌的发展及转移有关。5 RECK与HER-2/neu、VEGF在喉癌组织中的表达均有关,且随HER-2/neu和VEGF表达增高而减少,并均呈直线负相关。6 HER-2/neu与VEGF在喉癌组织中的表达有关,随VEGF表达增高而增高,呈直线正相关。