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目的:制备三氧化二砷(ATO)载药微球并研究其缓释特性,以肝癌细胞株HepG2、MHCC97H为研究对象,从细胞增殖、凋亡、侵袭以及VEGF、MMP9 mRNA表达水平等方面研究ATO及ATO载药微球在体外对肝癌细胞的作用,为后期动物实验研究奠定理论基础,以期为肝癌的综合介入治疗提供新的思路和理论依据。材料和方法:1.体外制备ATO载药微球,计算其载药量(LE%)和包封率(EE%),以及释药实验了解ATO载药微球的药物缓释规律;2.CCK8检测细胞增殖不同浓度(0、5、10、15、20ng/ml)ATO及ATO载药微球对肝癌HepG2、MHCC97H细胞作用不同时间(0、12、24、48、72、96h)增殖抑制的影响;3.侵袭实验观察不同浓度(0、5、10、15、20ng/ml)ATO及ATO载药微球处理48h后对HepG2、MHCC97H细胞侵袭的影响;4.双染法检测HepG2、MHCC97H细胞经不同浓度(0、5、10、15、20ng/ml)ATO及ATO载药微球处理48h后细胞凋亡;5.RT-PCR检测HepG2、MHCC97H细胞经不同浓度(0、5、10、15、20ng/ml)ATO及ATO载药微球处理24h、48h后VEGF,MMP9 mRNA表达水平;6.Western Blot检测HepG2、MHCC97H细胞经不同浓度(0、5、10、15、20ng/ml)ATO及ATO载药微球处理24h、48h后VEGF蛋白表达量。结果:1.CalliSpheres?可载药栓塞微球(100-300μm)对ATO的最佳载药时间为40min;1g粒径为100-300μm的载药微球,投入60mg(10mg/ml,6ml)的ATO,混合均匀后40min,可检测其内能荷载13.8±1.49mg ATO;包封率为25.0±1.34%;2.CalliSpheres?载ATO栓塞微球(100-300μm)体外药物释放显示30min内呈突释特征,突释量约达药物总量的31.42%,48h时释放量达47.17%;3.ATO组及ATO载药微球组在同一时间内,浓度为0~20ng/ml,随ATO浓度升高,HepG2、MHCC97H细胞的增殖抑制率表现为逐渐升高,两组组内比较差异有统计学意义(P<0.05);ATO组及ATO载药微球组在同一浓度内,随作用时间延长,HepG2、MHCC97H细胞的增殖抑制率表现为逐渐升高,但两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);4.ATO载药微球与单药ATO一样,随浓度增加其抑制HepG2、MHCC97H细胞侵袭能力明显加强;5.同浓度的ATO载药栓塞微球和单药ATO在同等时间内同样能促进HepG2、MHCC97H细胞凋亡;6.同浓度的ATO载药栓塞微球较单药ATO在同等时间内同样能抑制促血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP9)水平。结论:1.CalliSpheres?载药栓塞微球(100-300μm)可加载一定量带正电荷的ATO,具有药物缓释能力;2.同浓度的ATO载药微球较单药ATO在同等时间内同样能抑制HepG2、MHCC97H细胞增殖,并促进HepG2、MHCC97H细胞凋亡;3.同浓度的ATO载药微球较单药ATO在同等时间内同样能抑制VEGF、MMP9表达。