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目的:ErbB3是表皮生长因子受体家族的成员之一,在多种癌症组织中表达,Ebp1为ErbB3受体主要的结合蛋白之一,由人PA2G4基因编码,已有多篇文献报道Ebp1在人乳腺癌、口腔鳞状细胞癌、前列腺癌、以及肝癌等癌症中具有重要的调节作用,但是其在宫颈癌中的作用却罕见报道。已有研究发现Ebp1在宫颈癌组织中高表达,而在癌旁组织中低表达,但Ebp1对宫颈癌细胞生物学功能的影响尚不明确。因此本研究通过基因干扰技术,初步探讨Ebp1对宫颈癌细胞增殖、侵袭转移、和细胞凋亡等生物学功能的影响。方法:本研究采用重组慢病毒感染宫颈癌HELA细胞使Ebp1蛋白低表达。实验分为2组:PA2G4-RNAi病毒组(KD组)和阴性对照病毒组(NC组)。两组细胞感染72 h后用细胞免疫荧光和蛋白免疫印迹法检测KD组和NC组细胞Ebp1蛋白的表达情况,Ebp1蛋白表达显著降低说明转染成功。转染成功后用CCK-8检测KD组和NC组细胞活性,平板克隆和软琼脂克隆形成实验检测KD组和NC组细胞的增殖能力和集落形成能力,流式细胞术检测KD组和NC组细胞的细胞周期和凋亡情况,TUNEL法检测KD组和NC组细胞凋亡情况,划痕实验检测KD组和NC组细胞的迁移能力,Transwell小室法检测KD组和NC组细胞的侵袭能力。结果:1.免疫荧光检测结果显示,Ebp1蛋白主要表达在HELA细胞的细胞质,KD组荧光弱于NC组,表明基因转染抑制Ebp1蛋白的表达,同时蛋白免疫印迹检测结果与免疫荧光结果相似,KD组Ebp1蛋白表达显著低于NC组(P<0.001),可见,低表达Ebp1的HELA细胞系构建成功。2.CCK-8法检测结果显示,与NC组相比,KD组细胞生长较慢、增殖能力较弱。3.平板克隆实验和软琼脂克隆实验结果显示KD组细胞集落形成能力和细胞增殖能力显著低于NC组(P<0.001)。4.流式细胞术结果显示KD组G0/G1期细胞比例明显多于NC组(P<0.01),而S期和G2期细胞比例少于NC组,说明Ebp1基因沉默使HELA细胞阻滞在G0/G1 期。5.流式细胞术和TUNEL染色结果显示KD组凋亡细胞比例高于NC组(P<0.05),说明Ebp1基因沉默使HELA细胞凋亡增加。6.划痕实验和Transwell小室实验结果显示KD组细胞迁移能力低于NC组(P<0.05),细胞侵袭能力也小于NC组(P<0.01),说明Ebp1基因沉默后,HELA细胞的迁移和侵袭能力减弱。结论:1.Ebp1基因沉默使宫颈癌HELA细胞的增殖能力降低。2.Ebp1基因沉默使HELA细胞阻滞在G0/G1期并诱导凋亡。3.Ebp1基因沉默使宫颈癌HELA细胞的侵袭转移能力下降。