【摘 要】
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[目的]观察养精胶囊提取液对睾酮合成的影响,并探讨其具体的作用机制。[方法]以体外MLTC-1细胞培养为模型,加入养精胶囊提取液(0.01～1mg／mL)作用24h。用放射免疫法测定细胞上清
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[目的]观察养精胶囊提取液对睾酮合成的影响,并探讨其具体的作用机制。[方法]以体外MLTC-1细胞培养为模型,加入养精胶囊提取液(0.01～1mg／mL)作用24h。用放射免疫法测定细胞上清的睾酮浓度；用Real-time RT-PCR和Western Blot技术方法测定快速调节蛋白、细胞色素胆固醇侧链裂解酶和3β-羟类固醇脱氢酶：mRNA和蛋白质的表达。用无血清培养液诱导MLTC-1细胞凋亡,然后加入养精胶囊提取液(0.01～1mg／mL)作用48h,用MTT法检测细胞的活性；用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡；用real-time RT-PCR和分光光度法检测caspase-3的表达。[结果]养精胶囊提取液作用MLTC-1细胞24h后,能增加睾酮的合成；蛋白激酶A抑制剂-H89能显著抑制养精胶囊提取液合成睾酮的功能；养精胶囊提取液能提高快速调节蛋白、细胞色素胆固醇侧链裂解酶和3β-羟类固醇脱氢酶mRNA和蛋白质的表达水平。养精胶囊提取液加入MLTC-1细胞48h和72h后,能够增加细胞的活性。养精胶囊提取液刺激MLTC-1细胞48h后,能降低G0/G1期细胞比例,增加S期细胞比例；能降低细胞的凋亡率,增加细胞的存活率；能抑制细胞内caspase-3的表达。[结论]养精胶囊提取液能通过激活蛋白激酶A细胞通路,提高类固醇合成酶的活性,并且抑制细胞的凋亡,从而提高MLTC-1细胞合成睾酮的功能。
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