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目的:Exosome是由细胞内产生的,大小约为30-140nm的膜性小囊泡,其内含有各种类型的核酸,蛋白质,脂类物质。Exosome内含的miRNA-221与非编码RNA进行碱基配对可通过信号通路介导促进上皮间质化Epithelial-to-mesenchymal transition(EMT)使肿瘤更易发生转移。因此检测胃癌患者血清exosome内miRNA的含量是否能作为生物学指标来判断胃癌分期和是否转移,从而指导治疗。方法:共收集2014年6月至2016年3月入住湖南省肿瘤医院胃癌卵巢转移患者血清30份(实验组)。入组标准为:(1)已通过胃镜、病理活检、超声内镜、CT、B超确诊为胃癌卵巢转移患者;(2)未发现有其它的原发肿瘤;(3)患者未接受放化疗、中药治疗等辅助治疗;(4)非胃癌复发患者。30份未发生胃癌卵巢转移的女性患者血清(对照组)。入组标准为:(1)已通过胃镜活检、超声内镜、CT、B超确诊为胃癌;(2)未发现有胃癌的远处转移;(3)未发现有其它的原发肿瘤;(4)患者未接受放化疗、中药治疗等辅助治疗;(5)非胃癌复发患者。对抽取的血清样本于3000g离心15分钟去除细胞或细胞碎片;将上清转移至另一干净的灭菌管中,加入适量的ExoQuick TC试剂;上下颠倒离心管,混匀;4℃孵育过夜(至少12小时);室温或4℃1500g离心30min,管底可见沉淀;去除上清;1500g继续离心5min,小心去除上层的液体组分;用100-500ul buffer重悬沉淀。通过western blot检测CD9、CD63来证实exosome提取成功。TRIzol法来对exsome中5种miRNA(miR-221、miR-376c、miR-744、miR-451、miR-486)进行提取。然后通过PCR实验来对比试验组和对照组miRNA含量。结果:为了探究胃癌卵巢转移与非转移病人血清中exosome的miRNA的表达是否与胃癌卵巢转移呈相关性,我们选取了5种在癌症病人血清exosome中高表达的miRNA进行检测,发现在胃癌卵巢转移病人相比于未发生胃癌卵巢转移病人血清exosome中miR-221的含量有显著性差异(P<0.01),胃癌卵巢转移患者血清exosome中miR-221的含量呈明显的高表达,其它exosome中内含的miRNA如miR-376c、miR-774、miR-451和miR-486在胃癌卵巢转移患者和非转移病人血清中含量没有显著性差异。为了更细致分析地血清exosome中miR-221在不同年龄段胃癌卵巢转移病人的差异性,将胃癌卵巢转移患者按年龄分为20-40岁、40-60岁、60岁以上三组,其中20-40岁组患者相比于其他年龄段患者血清exosome中miR-221呈更高的表达水平。结论:1.胃癌卵巢转移患者血清exosome中miR-221呈明显高表达。2.血清exosome中miR-221有作为诊断胃癌卵巢转移的生物学指标的可能。3.胃癌卵巢转移患者血清exosome中miR-221含量还与年龄相关,20-40岁患者中该指标更高,预示着更明显的特征。