目的：阿霉素作为传统化疗药从上世纪70年代被使用至今,但其心脏毒性作用等毒性副作用已经严重影响到了它的临床使用,因此,如何提高局部的化疗药物浓度,减少对其它脏器的毒副作用,是肿瘤治疗学研究的一个重点。本课题旨在提高肿瘤组织的化疗药物浓度为目的,研究环境响应型血卟啉单甲醚与阿霉素联用后表现的联合效应,以降低阿霉素的毒性同时增加二者的抗肿瘤效果。尽管阿霉素和HMME-SDT均有致凋亡作用,但是二者联用的药效学作用和致凋亡机制目前尚不清楚。为此,本课题通过如下方法研究血卟啉单甲醚声动力治疗与阿霉素联合使用的联合效应和致凋亡机制。方法：本课题采用人胆管癌细胞作为研究的对象,实验共分12组,实验分组：为空白对照组、超声对照组、阿霉素组、阿霉素超声组、血卟啉低浓度组、血卟啉低剂量超声组、血卟啉高剂量组、血卟啉高剂量超声组、血卟啉低剂量与阿霉素联合组、血卟啉低剂量与阿霉素联合超声组、血卟啉高剂量与阿霉素联合组、血卟啉高剂量与阿霉素联合超声组。经过摸索,我们选定超声条件采用频率1.2MHZ,功率1w/cm2,超声作用120s；细胞培养24h后各组立即加入药物超声,MTT法检测超声后作用时间为0h、6h、12h、24h、36h、48h的胆管癌细胞存活率；细胞流式实验双染/单染检测药物——超声联合作用24h后细胞的凋亡以及细胞周期阻滞情况；Hoechst凋亡染色观察作用24细胞凋亡情况；Western-blot实验检测p53、Fas、Bax、Bcl-2、actatived caspase-3五个凋亡蛋白的表达情况；单细胞电泳实验和DNA ladder实验检测药物超声作用24h细胞的DNA损伤程度；Western-blot实验检测与DNA损伤密切相关的p53蛋白、y-H2A蛋白和MDM2蛋白在超声药物作用后12h、24h的表达调控情况。利用裸小鼠体内表达人源胆管癌细胞模型,注射给药研究超声联合用药在体内的肿瘤抑制效果。结果：MTT实验结果表明,血卟啉单甲醚与阿霉素联合超声组在各个时间点对QBC细胞的抑制作用强于其他各组,24小时结果更为明显,在血卟啉高剂量与阿霉素联合超声组的抑癌作用更是高于血卟啉低剂量与阿霉素联合超声组；流式细胞实验结果显示血卟啉高剂量与阿霉素联合超声组表现出明显的晚期凋亡,周期也明显阻滞于G2/M期；Hoechst凋亡染色实验也可以明显看到血卟啉与阿霉素联合超声组的致凋亡作用要强于其他各组,且血卟啉高剂量与阿霉素联合超声组更是强于血卟啉低剂量与阿霉素联合超声组；Western-blot实验结果显示p53、Fas、Bax、actatived caspase-3四个促凋亡蛋白明显上调,而Bcl-2作为抗凋亡蛋白被明显下调；单细胞电泳实验可以观察到血卟啉高剂量与阿霉素联合超声组具有明显的细胞拖尾现象,每组取100个细胞的平均TM值也可以看出血卟啉高剂量与阿霉素联合超声组的DNA损伤作用最强；DNAladder实验同样说明了这个结果；Western-blot实验结果显示,血卟啉高剂量与阿霉素联合超声组p53蛋白、y-H2A蛋白和MDM2蛋白与其它各组相比在各个时间点均表现出了最明显的上调或下调作用,其中p53蛋白和y-H2A蛋白表现为上调,MDM2蛋白表现为下调。经过裸小鼠体内肿瘤移植模型研究发现,超声联合用药组裸鼠肿瘤被明显抑制,无论瘤体大小、体积还是瘤重均表现出明显的药效学作用。结论：综合各方面实验结果,认为：血卟啉单甲醚与阿霉素联合超声作用使用了低剂量的阿霉素和血卟啉单甲醚不但降低了药物的毒性而且体现出比单一用药更加有效的治疗作用。本研究的结果证明血卟啉单甲醚与阿霉素联合超声作用对胆管癌细胞的增殖抑制具有明显的协同作用,且其协同作用加剧了细胞内的DNA损伤,引起细胞凋亡。对于DNA损伤加剧的原因可能是1：超声后激活声动力光敏剂产生自由基2：阿霉素本身参与代谢的过程就能产生自由基3：超声后改变了细胞膜的通透性,引起细胞内药物浓度增加；而细胞内自由基的增加应该是造成DNA损伤加剧的主要因素。