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研究目的：KLF4在细胞分化和增殖中发挥着重要的作用。我们之前的研究已经发现KLF4小鼠在极化期和分泌期的成牙本质细胞中有特异性的表达,但是KLF4在成牙本质细胞分化过程中是否发挥作用,及发挥何种作用尚未可知。本研究的目的是为了明确KLF4在成牙本质细胞分化中的作用。研究方法：本研究中使用矿化诱导液在体外诱导人牙髓细胞向成牙本质细胞样细胞分化。第一部分实验检测人牙髓细胞向成牙本质细胞样细胞分化的过程中KLF4的mRNA和蛋白质表达水平、碱性磷酸酶(ALP)活性和成牙本质细胞分化相关基因(DSPP、DMP1、ALP)的表达；同时通过EdU掺入法检测细胞的增殖能力。第二部分实验构建包含KLF4全长的pKLF4-IRES2-EGFP质粒转染人牙髓细胞,检测过表达KLF4时成牙本质细胞分化相关基因(ALP、DSPP、DMP1)的表达和ALP的活性,同时也检测了过表达KLF4对牙髓细胞增殖能力的影响。第三部分实验构建人KLF4基因shRNA慢病毒载体,包装病毒后用其感染人牙髓细胞,经过矿化诱导液作用后检测KLF4和成牙本质细胞分化相关基因(DSP、DMP1)的表达和ALP的活性。结果：第一部分：在人牙髓细胞向成牙本质细胞样细胞的分化过程中,ALP的活性第5天显著增加,成牙本质细胞分化的相关基因(DMP1、DSPP、ALP)呈现逐渐增加的趋势,同时细胞的增殖能力降低。在mRNA水平上,KLF4在矿化诱导第5天显著增加,以后持续增加直到14天；在蛋白质水平,KLF4在矿化诱导第7天表达增强,直到第14天表达都维持在一个较高的水平。免疫荧光的结果也显示与第0天相比,第7天的KLF4表达显著增强。第二部分：使用瞬时转染技术使KLF4表达上调后,ALP的活性显著增加；成牙本质细胞的分化标记物(DSPP、DMP1、ALP)均表达上调；而牙髓细胞的增殖能力显著下降。第三部分：使用RNA干扰技术抑制KLF4的表达,结果显示矿化诱导14天后,shRNA-KLF4组中KLF4的表达与对照组相比显著减弱,ALP的活性与对照组相比显著降低；相关的成牙本质细胞分化标记物DMP1表达降低,KLF4基因抑制对DSP的表达影响不明显。结论：KLF4可以促进人牙髓细胞向成牙本质细胞样细胞分化,并抑制人牙髓细胞的增殖。