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雏鸡中脑的视顶盖为鸟类视觉信息通路的重要通路,经染色后可以观察到明显的分层构造。本试验采用尼氏体染色法以及快蓝(Fast Blue,FB)逆行标记结合细胞内注射荧光黄(Lucifer Yellow, LY)的方法:先向雏鸡圆核内注射快蓝(Fast blue,FB)逆向荧光标记视顶盖中央灰质层(Stratum griseum central,SGC)神经元,84h后灌流固定、制作300μm厚的中脑振动切片、荧光显微镜下通过显微操作系统向FB标记的SGC神经元内微电泳法注入荧光染料荧光黄。分别对不同胚龄的鸡胚和雏鸡进行染色,以观测不同胚龄鸡胚SGC的发育情况和雏鸡SGC神经元的细胞形态,并且对细胞内注射荧光黄的方法进行初步探索,为进一步对鸡的信息通路提供参考。 结果显示,在鸡的不同胚龄,SGC的厚度在视顶盖总厚度的比例有差异。在E11,E14,E17以及E20时期,SGC的厚度为(132.95±14.80)μm,(150.38±37.83)μm,(167.88±10.05)μm,(171.09±31.98)μm(n=40);不同胚龄时期SGC在视顶盖总厚度中所占比例分别为24.23%,26.88%,28.92%,29.42%。由此推测,SGC的厚度呈现最初增殖较快,后期趋于平缓,E20时发育停止。荧光黄在雏鸡细胞内注射后,可以在SGC神经元观察到的主要形式有三角形、椭圆形、梭形和多边形,最常见的一种是三角形。对63例SGC细胞进行测量和生物统计测得细胞体的面积平均为(336.91±70.81)μm2,树突野平均为(121.27±49.54)μm,长径(29.38±6.44)μm,短径(14.20±1.65)μm。划定细胞长直径大于30μm为,20~30μm之间以及小于20μm的分别为大、中、小细胞,SGC神经元的测定结果为,大细胞约占46.03%(n=29),中型细胞约占46.03%(n=29),小型细胞约占7.94%(n=5)。由此可知,在SGC中主要细胞为大、中型细胞。规定树突野范围小于90μm的窄树突野,范围在90μm~150μm之间的为中树突野,树突野长度大于150μm的为宽树突野。试验所得63个细胞对SGC神经元进行的测定,窄树突野占25.40%(n=16),中树突野占44.44%(n=28),宽树突野占30.16%(n=19)。对细胞的分型统计测得,位于SGC浅层部位,其树突末端投射到中脑顶盖的F层的1型细胞胞体的面积平均值为(262.2±72.4)μm2(n=22),位于SGC浅层树突末端投射到中脑顶盖D层的2型细胞胞体的面积平均值为(321.7±157.9)μm2(n=19),位于SGC的深层,树突主要斜向投射到中脑顶盖H~J层的3型细胞胞体的面积平均值为(408.20±180.13)μm2(n=13),位于SGC细胞的深层,其树突野与顶盖表面平行,水平投射在SGC神经元内的4型细胞胞体的面积平均值为(363.52±118.23)μm2(n=9)。对SGC神经元的树突野运用数据统计方法进行统计分析,测得1型细胞的树突野的平均值为(277.79±133.6)μm(n=20),2型细胞树突野的平均值为(236.07±113.2)μm(n=21),3型细胞树突野的平均值为(195.49±90.3)μm(n=14),4型细胞树突野的平均值为(148.86±110.2)μm(n=8)。 本试验采用细胞内注射荧光黄对鸡的视顶盖神经元进行研究的方法可观察到完整的投射向圆核的SGC神经元胞体和突起。与其它标记法相比,荧光黄细胞内注射法可以标记单一神经元,且对所标记的投射部位非常准确,不会被周围细胞的纤维干扰,是一种研究中枢神经系统神经元间投射关系及其起源细胞的好方法。