噬菌体展示技术是一种有效的高通量技术,常被用来识别某一靶分子的多肽配体。近年来,利用噬菌体展示肽库进行生物标志物的筛选引起了广泛关注,筛选得到的特异性结合某种标志物的噬菌体,可以用于各类生物标志物的检测。甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein,AFP）是肝癌的重要标志物,建立合适的方法进行甲胎蛋白的检测对人类的健康具有重要意义。本研究利用噬菌体随机肽库筛选技术从噬菌体随机十二肽库中通过正筛选和负筛选得到亲甲胎蛋白噬菌体,并通过测序技术和特异性验证实验得到高亲和力和特异性的甲胎蛋白结合肽（GVLHMYDLPYNG）。在传统的双抗体夹心法的基础上,即先用甲胎蛋白抗体（捕获抗体）标记的免疫磁珠作为固相载体,捕获样品溶液中的甲胎蛋白（抗原）,用具有较高摩尔吸光系数的纳米金对甲胎蛋白特异性结合的噬菌体进行标记,得到纳米金-噬菌体复合物（AuNPs-phage）,作为免疫反应的检测抗体参与免疫反应。免疫反应之后,上清和免疫复合物的分离采取磁分离的方式,上清中剩余的纳米金-噬菌体复合物用来猝灭异硫氰酸荧光素（FITC）的荧光,纳米金通过内滤效应（Inner-filter effect,IFE）可将FITC的荧光定量猝灭,通过荧光猝灭的程度与甲胎蛋白浓度的定量关系来间接地进行甲胎蛋白的检测。实验考察了甲胎蛋白测定的最优条件,其线性范围为0.01-0.10 μg mL-1,精密度为1.6%（n=7,0.05 μgmL-1）,检出限为8 ng mL-1（3σ,n=7）。为了评估检测体系对甲胎蛋白的选择性,实验考察了人血清中可能存在的其他标志物蛋白对本方法的干扰,实验证明该方法对甲胎蛋白具有较高的选择性。用本方法对人血清中的甲胎蛋白进行加标回收实验,回收率在92.5-94.3%之间,说明该方法具有较好的准确性和可操作性。