论文部分内容阅读
目的:探讨促性腺激素和细胞因子在上皮性卵巢癌发生发展中的作用。 方法:应用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),免疫印迹(Western blot)检测10例正常卵巢组织、30例良性卵巢肿瘤组织及32例上皮性卵巢癌组织的卵泡刺激素受体(FSHR)mRNA和蛋白的表达情况。应用RT-PCR方法检测经卵泡刺激素(FSH),黄体生成素(LH)及人重组白细胞介素-6(hrIL-6)处理卵巢癌细胞株OVCAR-3、Caov-3中核转录因子-kB(NF-kB)mRNA表达水平;应用ELISA方法检测处理后细胞胞浆和胞核中NF-kB蛋白的变化;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验观察FSH,LH,hrIL-6对上述卵巢癌细胞株增殖的影响;应用ELISA方法,检测卵巢癌细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9以及TIMP-1、TIMP-2的分泌水平;采用MTS掺入试验,检测在rhMMP-2,或抗MMP-2中和抗体的作用下,卵巢癌细胞的增殖水平。 结果:FSHR mRNA在正常卵巢组织中均表达(10/10),良性卵巢肿瘤组织中表达率为96.7%(29/30),恶性卵巢癌组织中表达率为59.4(19/32);其蛋白在正常卵巢组织中均表达(10/10),良性卵巢肿瘤组织中表达率为90%(27/30),恶性卵巢癌组织中表达率为46.9%(15/32),恶性卵巢癌组织中FSHR表达率明显低于正常卵巢组织(p<0.01)和良性卵巢肿瘤组织(p<0.01),而且FSHR的表达程度,从正常卵巢组织到良性卵巢肿瘤组织再到上皮性卵巢癌组织呈下降趋势。FSH、LH对卵巢癌细胞株OVCAR-3、Caov-3具有促增殖作用,并使细胞内NF-kB表达增加,与对照组相比差异有显著意义。在卵巢癌细胞培养液中加入50ug/ml抗IL-6中和性抗体,2种卵巢癌细胞的生长均有所减慢,NF-kB表达下降。hrIL-6促卵巢癌细胞株OVCAR-3、Caov-3的增殖作用呈剂量依赖性,且使NF-kB表达增加,上述现象可被抗IL-6中和性抗体所抑制。提示促性腺激素促增殖过程可能由IL-6介导。卵巢癌细胞能自发的分泌一定水平的MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2。MMP-2对卵巢癌细胞有明显的促增殖作用,硕士研究生学位论文抗MMP一2单克隆抗体能够明显的抑制卵巢癌细胞的生长。结论:机体内促性腺激素水平异常与上皮性卵巢肿瘤形成密切相关,激素与细胞因子及核转录因子一kB影响其发展和转归。