PevD1是作者实验室前期从大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）XII8菌株的发酵液中分离筛选获得的蛋白激发子,能提高棉花和烟草对大丽轮枝菌,烟草对烟草花叶病毒（TMV）和丁香假单胞菌（Pseudomonas syringae）的抗性。前期从本生烟响应PevD1诱导的大量差异表达基因（Differential Expression Gene,DEGs）中筛选出了ERF（Ethylene response factor）家族的转录因子ERF114。本文用拟南芥和细菌病原菌丁香假单胞菌（Pst DC3000）为研究系统,探索ERF114参与PevD1诱导抗病性的功能及分子机制。主要研究结果如下:1.明确了PevD1诱导拟南芥防御反应和Pst DC3000的抗病性PevD1渗入拟南芥叶片后,引起明显的过氧化氢沉积,抗病基因PR1和PR5的表达也是显著上调表达;诱导抗病性检测结果显示,PevD1诱导的拟南芥抗病性对Pst DC3000的抗性。2.ERF114受到激发子PevD1和病原菌Pst DC3000侵染的诱导表达qPCR检测分析表明,PevD1叶片渗入和Pst DC3000侵染均能引起ERF114基因的转录上调。为了更直观观察到ERF114的转录激活表达情况,构建了Prom ERF114:GUS载体,并获得了转基因植株。通过对转基因植株叶片GUS染色,观察到PevD1渗入的叶片部位和病原菌接种部位均有明显的深蓝色,进一步确定了拟南芥中ERF114能够响应蛋白激发子PevD1的诱导和病原菌Pst DC3000的侵染。3.明确了ERF114正调控PevD1诱导的抗病性为进一步研究ERF114的功能,构建了erf114缺失突变株和ERF114的组成型过表达植株,通过检测过氧化氢沉积、抗病基因表达以及对Pst DC3000的抗性实验,确定了ERF114正调节拟南芥对Pst DC3000的抗性。用PevD1处理以上转基因植株,进一步明确了ERF114介导了PevD1诱导的抗病性。4.ERF114调控PAL1及其下游基因的表达,并且ERF114与PAL1的启动子特异性结合并调控其转录表达转录组测序数据分析表明,ERF114调控的差异表达基因显著富集在苯丙烷代谢通路上,进一步qPCR验证结果表明ERF114调控PAL1基因及其下游基因的表达。基于PAL1启动子上存在ERF114结合位点的生物信息学分析,推测可能ERF114作为转录因子调控PAL1的表达。构建了ERF114原核表达载体,并获得了重组表达的ERF114蛋白,通过EMSA和Ch IP-qPCR技术证明了ERF114确实能与PAL1启动子序列结合。为了证明ERF114能激活PAL1转录,构建了ERF114的诱导型过表达植株,qPCR检测证明了PAL1基因的表达依赖于ERF114基因表达,说明了ERF114能够激活PAL1的表达;同时证明了ERF114介导了PevD1诱导PAL1的表达。5.ERF114正向调控木质素与水杨酸的积累PAL1作为苯丙烷代谢通路上的关键基因参与了植物木质素与水杨酸的合成,并对植株的抗病功能起到非常重要的作用。为了解ERF114调控抗病性的分子基础,本研究检测了erf114缺失突变株、ERF114过表达株和野生型拟南芥的木质素和水杨酸含量,并检测了这些株系经PevD1处理后的木质素和水杨酸含量的变化。结果表明,ERF114不仅正向调控木质素和水杨酸合成,而且介导了PevD1诱导的木质素和水杨酸的积累。通过以上研究,明确了PevD1通过诱导转录因子ERF114的上调表达,激活了苯丙烷代谢途径中的第一个关键酶PAL1,促进了该合成途径产物木质素和水杨酸的合成和积累,最终提高了拟南芥植株对Pst DC3000的抗性。