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目的：研究钙池操纵的钙离子通道和高迁移率族蛋白B1在H2O2诱导的肝细胞损伤中的作用及胞内信号通路;探讨麦冬黄烷酮F抑制H2O2诱导损伤的机制。 方法：1.培养小鼠胚胎肝细胞，使用H2O2建立肝细胞损伤模型，通过激光共聚焦观察胞内Ca+荧光强度实时变化;Western-blotting检测PLCγ1-IP3R-SOCs信号通路相关蛋白PLCγ1、p-PLCγ1、STIM1和Orai1的表达。2.采用RNAi技术，STIM1-siRNA瞬时转染细胞。3.A23187作用于细胞制各钙超载模型，通过激光共聚焦检测Ca2+荧光强度;试剂盒检测培养上清液中LDH含量;ELISA检测培养上清液中的HMGB1含量;Western-blotting检测胞质/胞核HMGB1的表达以及胞核内PKCα和CaMKⅣ的表达;免疫沉淀检测HMGB1与PKCα和CaMKⅣ的相互作用。4.H2O2刺激细胞，检测培养上清液中LDH和HMGB1含量;检测HMGB1以及PKCα和CaMKⅣ的表达;检测HMGB1与PKCα和CaMKⅣ的相互作用。5.58-F预处理，通过激光共聚焦观察胞内Ca2+荧光强度实时变化;58-F预处理对PLCγ1-IP3R-SOCs信号通路相关蛋白PLCγ1、p-PLCγ1、STIM1和Orai1表达的影响;对培养上清液中LDH和HMGB1含量的影响;对HMGB1的表达以及PKCα和CaMKⅣ的表达的影响;对HMGB1与PKCα和CaMKⅣ的相互作用的影响。 结果：1.在0Ca2+情况下，加入1mM或500μMH2O2后反映[Ca2+]i的荧光强度曲线升高，加入CaCl2后曲线大幅度升高;与对照组比较，NAC、2-APB和U73122预处理组不同程度降低[Ca2+]i的荧光强度曲线。2.与对照组比较，500μM H2O2刺激细胞3h可显著增加SOCs相关蛋白STIM1和Orai1的表达（P＜0.05）;显著增加p-PLCγ1蛋白质表达(P＜0.01)。3.与H2O2组比较，2-APB预处理组显著降低STIM1和Orai1的表达(P＜0.05);U73122干预组可以明显降低H2O2刺激引起的p-PLCγ1蛋白质的增加(P＜0.01)。4.细胞转染48h后在荧光显微镜下可看到大面积的红色荧光;与对照组和NC-siRNA组比较，STIM1-siRNA组STIM1蛋白的表达明显降低(P＜0.05)，与对照组和NC-siRNA组比较，加入CaCl2后STIM1-siRNA组显著抑制了反映[Ca2+]i荧光强度曲线的升高(P＜0.05)。5.与对照组比较，A23187组胞内Ca2+荧光强度明显高于对照组(P＜0.05），加入EGTA后较A23187组显著降低Ca2+荧光强度(P＜0.05);6.与对照组比较，25μMA23187作用24h后可明显增加细胞的损伤率(P＜0.05）;培养上清液和胞质中HMGB1含量明显增加(P＜0.05)，胞核中HMGB1蛋白的表达降低（P＜0.05）;PKCα和CaMKⅣ在胞核内的表达增高（P＜0.05）;免疫沉淀结果显示A23187刺激细胞后PKCα和CaMKⅣ与HMGB1相互结合。7.与对照组比较，500μM H2O2刺激细胞可显著增加细胞的损伤率(P＜0.05），增加培养上清液中HMGB1含量(P＜0.05)，显著降低胞核中HMGB1的表达，增加胞质中HMGB1的表达;显著增加胞核内PKCα和CaMKⅣ的表达(P＜0.01，P＜0.001);免疫沉淀结果显示H2O2刺激细胞后PKCα和CaMKⅣ与HMGB1相互结合。8.与对照组比较，50μM58-F预处理24h后，在加入H2O2和CaCl2情况下对[Ca2+]i的荧光强度曲线升高有不同程度的抑制(P＜0.05);显著降低STIM1及Orai1蛋白表达水平(P＜0.05);显著降低p-PLCγ1蛋臼质表达(P＜0.05)。9.与H2O2组比较，58-F预处理，可显著降低细胞的损伤率(P＜0.01);抑制H2O2刺激导致的培养上清液中HMGB1含量的增加(P＜0.05)，显著降低胞质中HMGB1的表达(P＜0.001)，抑制胞核中HMGB1表达的减少(P＜0.001);降低PKCα和CaMKⅣ在胞核中的表达(P＜0.05);免疫沉淀结果显示可以抑制H2O2刺激后PKCα和CaMKⅣ与HMGB1的相互结合。 结论：1.H2O2通过PLCγ1-IP3R-SOCs信号通路诱导肝细胞钙稳态失调; 2.胞内Ca2+浓度增加可以激活PKCα和CaMKⅣ，增加HMGB1释放; 3.58-F预处理可以调控胞内Ca2+浓度，降低HMGB1的释放，抑制H2O2诱导的肝细胞损伤。