目的：1、介绍导师治疗子宫腺肌病的学术思想和临证经验,总结其用药规律以及临证化裁。2、观察不同浓度加味芍药甘草汤对人子宫腺肌病病灶细胞上清液雌二醇、细胞雌激素受体、芳香化酶P450、MAPK信号通路因子(Ras、Raf、MEK-2、ERK1、ERK2)、细胞核内转录因子(NF-kB、c-Fos、c-Jun)、细胞超微结构、细胞凋亡率的变化,阐明中药复方加味芍药甘草汤干预子宫腺肌病痛经的深层作用机理,为临床辨证用药奠定基础。方法：1、通过多种途径全面系统收集、仔细阅读李坤寅教授多年来发表的及未发表的论文、专著、讲稿、临证体会,以及跟诊过程中收集李教授的临床经验及行之有效的遣方用药,分析、总结李坤寅教授治疗子宫腺肌病的学术思想、辨证思路及用药规律。2、采用透射电镜、流式细胞技术、酶联免疫吸附法、免疫细胞化学法、荧光定量PCR(探针法)、免疫蛋白印迹法检测不同浓度加味芍药甘草汤对人子宫腺肌病病灶细胞超微结构、细胞凋亡率、细胞上清液雌二醇、细胞芳香化酶、雌激素受体、MAPK信号通路因子(Ras、Raf、MEK-2、ERK1、ERK2)、细胞核内转录因子(NF-kB、c-Fos、 c-Jun)。并以空白培养液和米非司酮作为对照组。结果：1、导师李坤寅教授治疗子宫腺肌病学术思想可概括成6点：明确病机,辨病辨证,确立治法；经前经后,止痛调经,分而治之；治病与调经助孕结合；内外结合,多途径治疗；情志疏导与饮食调控结合。临证应用在此基础上各有发挥：月经前在使用“化瘀止痛方”的基础上,针对不同患者的特质配合不同的活血化瘀法加以化裁；经后重在补肾活血,扶正祛邪,调经助孕；复方毛冬青灌肠液保留灌肠及加味双柏油膏配合红外线灯热敷下腹部,清热解毒兼活血化瘀行气。除了配合使用疏肝解郁中药外,导师临证时重视心理治疗,给患者做思想工作,并建议患者少食含激素类高的食物,结合饮食调控疾病。在“化瘀止痛方”前期研究的基础上,进一步优化组成“加味芍药甘草汤”。2、加味芍药甘草汤对细胞超微结构的影响：空白对照组：核仁较大,核中常染色质较多,粗面内质网增多、扩张,线粒体较多；米非司酮组：细胞核呈圆形,核中常染色质较多,核仁靠近胞核,胞浆中线粒体形状不规则,部分发生了空泡变,溶酶体较多,内质网增多、扩张；加味芍药甘草汤高浓度组：细胞核见分叶,染色质浓缩边集,核仁缩小,胞浆中见大量溶酶体,胞质内细胞器减少,内质网轻微扩张,线粒体发生了明显的空泡变,粗面内质网减少；加味芍药甘草汤中浓度组：细胞核中常染色质较多,核近似椭圆形,溶酶体较多,线粒体轻微肿胀空泡变,内质网轻微的扩张；加味芍药甘草汤低浓度组：核中常染色质较多,核近圆形,胞浆中可见溶酶体聚集在一侧,有较多脂滴,内质网有些轻微的扩张。3、加味芍药甘草汤对细胞凋亡率的影响：米非司酮与中药各浓度组都能显著提高细胞凋亡率(P<0.05),其中米非司酮与加味芍药甘草汤高浓度组相比无显著性差异(P>0.05),米非司酮、加味芍药甘草汤高浓度组与加味芍药甘草汤中、低浓度组相比有显著性差异(P<0.05),提示加味芍药甘草汤提高人子宫腺肌病细胞凋亡率成浓度依赖性4、加味芍药甘草汤对细胞E2、芳香化酶、ER的影响：米非司酮和加味芍药甘草汤高浓度组与空白对照组相比都能显著降低细胞上清E2水平(P<0.05),米非司酮组与加味芍药甘草汤高浓度组相比无明显差异(P>0.05)；米非司酮E2水平表达显著低于加味芍药甘草汤中、低浓度组(P<0.05),加味芍药甘草汤高浓度组E2表达显著低于加味芍药甘草汤低浓度组(P<0.05)。加味芍药甘草汤高、中、低浓度组与空白对照组相比都能显著抑制芳香化酶P450表达(P<0.05),但各组之间相比无显著性差异(P>0.05)。加味芍药甘草汤高、中、低浓度组与空白对照组相比都能显著降低细胞ER水平(P<0.05),但各组之间相比无显著性差异(P>0.05)。5、加味芍药甘草汤对MAPK信号通路因子(Ras、Raf、MEK-2、ERK1、ERK2)的影响：加味芍药甘草汤各浓度组和米非司酮不能显著改变MAPK信号通路因子(Ras、 Raf、MEK-2、ERK1、ERK2)的变化(P>0.05)。6、加味芍药甘草汤对细胞核内转录因子(NF-k B、c-Fos、c-Jun)的影响：米非司酮和加味芍药甘草汤各浓度组都能显著抑制NF-k B、c-Fos、c-Jun表达(P<0.05),其中加味芍药甘草汤高浓度组抑制能力最强(P<0.05),存在明显的浓度依赖性。结论：1、导师李坤寅教授治疗子宫腺肌病注重辨病辨证,兼顾患者生育要求,根据月经周期不同规律分期治疗,通过多途径治疗、情志疏导结合饮食调控疾病。在“化瘀止痛方”前期研究的基础上,进一步优化组成“加味芍药甘草汤”。2、加味芍药甘草汤可能通过改变细胞器结构,使溶酶体增多,染色质浓缩边集以提高细胞凋亡率,从而抑制子宫腺肌病病灶增殖,促进子宫腺肌病病灶萎缩。3、加味芍药甘草汤通过抑制ER表达从而降低E2与ER结合率,E2生物学效应降低,可阻断或减少了异位病灶组织在肌层内种植、生长；另外加味芍药甘草汤通过抑制芳香化酶以阻断与病灶局部E2正反馈循环,从而降低病灶局部细胞分泌E2含量,一则雌激素对子宫收缩的调节作用减少,子宫收缩性减弱,从而缓解或消除痛经；二则雌激素对异位内膜的生物学信号减少,同样也阻断或减少了异位内膜在肌层继续增殖、生长。4、加味芍药甘草汤有可能只是改变了子宫腺肌病细胞中Ras、Raf、MEK-2、ERK1、 ERK2磷酸化活性,没有改变各因子的表达数量。5、加味芍药甘草汤通过抑制NF-kB、c-Fos、c-Jun表达,降低子宫腺肌病病灶细胞的异常增殖,阻碍了子宫腺肌病的发展,这一效应可能通过降低雌激素与雌激素受体的结合,抑制雌激素经典基因转录效应实现。