【摘 要】
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目的:建立人喉咽癌Hep-2/5-Fu多药耐药细胞株,以进一步研究喉咽部肿瘤MDR的机制。方法:采用体外药物浓度梯度递增的诱导方法建立5-Fu获得Hep-2/5-Fu多药耐药细胞株。采用MTT
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目的:建立人喉咽癌Hep-2/5-Fu多药耐药细胞株,以进一步研究喉咽部肿瘤MDR的机制。方法:采用体外药物浓度梯度递增的诱导方法建立5-Fu获得Hep-2/5-Fu多药耐药细胞株。采用MTT法检测Hep-2细胞和Hep-2/5-Fu耐药细胞株的IC50,并计算其耐药指数。观察其细胞形态学、生长曲线、倍增时间。细胞免疫组化、逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测P糖蛋白(P-170)、肺耐药相关蛋白(LRP)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)及其mRNA在Hep-2和Hep-2/5-Fu细胞内的表达。结果:亲本细胞Hep-2经5-Fu耐药筛选2个月后成功建立人喉咽癌Hep-2/5-Fu多药耐药细胞株模型。体外培养见细胞趋向群集性生长,耐药细胞株倍增时间较亲本细胞株长。由MTT法测得其5-Fu的IC50为由筛选前的2ug/ml上升到约60ug/ml。免疫组化和RT-PCR检测耐药细胞P-170、LRP表达量较亲本细胞明显增强,而耐药细胞TopoⅡ表达量较亲本细胞明显下降。结论:人喉咽癌Hep-2/5-Fu多药耐药细胞株可以成为研究人喉咽癌5-Fu获得性耐药机制及开展多药耐药逆转剂筛选较好的体外模型。
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