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目的:通过建立大鼠舌下神经的压榨损伤模型,检测在中药脑溢安干预后,舌下神经核内:P75的表达情况,并观察神经元轴突和雪旺氏细胞超微结构以及髓鞘板层形态结构的变化,探讨脑溢安对大鼠舌下神经损伤后是否具有神经元的保护作用及其是否促进舌下神经损伤后的修复再生。
方法:健康成年SD大鼠60只(雌雄各半,体重200-250g),随机取20只作为正常对照组(NC组,n=20),剩余40,口、建立舌下神经压榨损伤模型,然后随机分为两组:脑溢安治疗组(NYA组,n=20)和生理盐水对照组(NS组,n=20)。NYA组动物用脑溢安颗粒剂以灭菌生理盐水调成药液灌胃,而正常对照组和实验对照组动物则用灭菌生理盐水灌胃。动物分别存活1d,4d,7d,14d后灌注固定并取脑切片进行下列研究:采用免疫组织化学方法观察舌下神经核内运动神经元胞体P75的表达变化;采用-Nissl染色方法观察舌下神经核内运动神经元形态及数量变化、计算损伤侧神经元的存活率;采用超薄切片形态学方法观察舌下神经损伤后远端的再生情况。
结果:免疫组化结果显示正常对照组大鼠两侧舌下神经核内均无P75免疫反应阳性物表达,生理盐水对照组和脑溢安治疗组舌下神经压榨损伤术后损伤侧(右侧)舌下神经核内神经元胞体开始重新表达P75。生理盐水对照组术后1天损伤侧(右侧)舌下神经核内神经元胞体开始低量表达P75,7天时P75表达量达高峰,14天P75表达量仍维持高水平,略有下降。脑溢安治疗组术后1天损伤侧(右侧)舌下神经核内神经元胞体也开始低表达P75,7天时P75表达量最多,14天P75表达量开始下降,7天和14天P75表达有显著性差异,(P<0.05)。与生理盐水对照组相比,脑溢安治疗组损伤后4d、7d和14d损伤侧舌下神经核内P75免疫阳性细胞平均灰度值显著降低,阳性细胞数减少,有统计学差异(P<0.05)。Nissl染色显示术后7、14天脑溢安治疗组损伤侧舌下神经核内运动神经元存活率明显高于生理盐水对照组,两者差异有显著性意义(P<0.05)。超薄切片观察可见术后4、7、14天脑溢安治疗组损伤远端有髓神经纤维髓鞘厚度、板层结构致密度、清晰度,轴突内细胞器结构,雪旺细胞增殖程度均优于生理盐水对照组。
结论:1.脑溢安下调大鼠舌下神经压榨损伤后神经元胞体P75的表达。2.脑溢安在舌下神经压榨损伤后对神经元胞体具有保护作用。3.脑溢安促进舌下神经压榨损伤后的再生和修复。