CO2人工气腹环境对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖的影响

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目的:通过研究CO2人工气腹环境对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖活性的影响,探讨可能的分子机制和影响时效,以评价CO2气腹腹腔镜手术在卵巢癌中应用的安全性。方法:(1)建立体外模拟CO2气腹环境,将人卵巢癌细胞株SKOV3暴露于不同压力(8mmHg和12mmHg)的CO2环境,分别持续作用2h和4h后,脱离气腹环境,放入常规5%CO2、37℃培养箱中培养24h、48h、72h和14d,对照组在5%CO2、37℃培养箱中持续常规培养。(2)采用MTT比色实验检测对照组与上述各实验组常规培养24h、48h和72h后各组细胞的增殖活性。(3)采用平板克隆形成实验检测对照组与各实验组常规培养14d后的克隆形成率。(4)采用western-blotting蛋白印迹法检测:①对照组与各实验组常规培养24h后各组细胞中细胞周期蛋白CyclinD1和血管内皮生长因子VEGF的蛋白表达;②12mmHg,CO2气腹环境作用4h后,脱离气腹环境,继续常规培养24h、48h和72h后各实验组与对照组细胞中CyclinD1和VEGF的蛋白表达。结果,⑴SKOV3细胞在8mmHg CO2人工气腹分别持续作用2h、4h后,继续常规培养24h、48h,其OD值均明显高于对照组﹙P<0.05﹚;常规培养72h,其OD值与对照组比较,差异均无统计意义﹙P>0.05﹚。⑵SKOV3细胞在12mmHgCO2人工气腹分别持续作用2h、4h后,常规培养24h、48h,其OD值均明显高于对照组﹙P<0.05﹚;常规培养72h,其OD值与对照组无显著差异﹙P>0.05﹚。⑶SKOV3细胞在8mmHg、12mmHg,分别持续作用2h、4h后,常规培养14d,各组细胞克隆形成率与对照组比较,差异无统计意义(P>0.05﹚。⑷SKOV3细胞在8mmHg、12mmHgCO2人工气腹,分别持续作用2h、4h后,常规培养24h,各组细胞中的CyclinD1和VEGF蛋白表达均高于对照组﹙P<0.05﹚;12mmHgCO2人工气腹,持续作用4h后,常规培养24h、48h,各组细胞中的CyclinD1和VEGF蛋白表达均高于对照组﹙P<0.05﹚,常规培养72h,该两种蛋白表达与对照组比较,差异均无统计意义(P>0.05﹚。结论:⑴CO2气腹环境可促进卵巢癌SKOV3细胞的增殖,所发生的改变72h内可发生可逆性恢复;⑵CO2气腹环境可促进CyclinD1和VEGF蛋白表达增加,气腹作用4h内所引起的改变72h内可发生可逆性恢复。⑶CO2气腹环境可促进卵巢癌SKOV3细胞的增殖活性,其机制可能是通过促进CyclinD1和VEGF蛋白表达增加,所发生的改变可发生可逆性恢复,提示CO2气腹腹腔镜手术在卵巢癌中的应用是安全的。
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