研究背景:视网膜新生血管(retinal neovascularization, RNV)是一系列缺血缺氧性视网膜疾病的共同病理表现,包括:糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)、视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion, RVO)、早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity, ROP)等。由于视网膜缺氧,造成促血管生长因子如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor , VEGF)表达量增加,从而促进视网膜血管内皮细胞分裂、增生,形成新生血管。目前,对于此类疾病的药物治疗主要是抑制VEGF从而抑制新生血管的生长,然而促血管生长因子种类繁多只针对VEGF的治疗效果并不理想。因此非常有必要在促血管内皮生长因子的上游寻找更有效的方法来治疗视网膜新生血管疾病。脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase 2, PHD2)是缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor, HIF)-1a的降解酶,而HIF-1a可以调节VEGF、EPO等多种因子的表达[1,2]。近年来,对于PHD2的新认识表明抑制其表达后具有促进肿瘤新生血管正常化的作用[3,4]。那么其对于眼部新生血管是否具有抑制作用尚未见报道。因此,本研究拟通过抑制PHD2,以观察其对视网膜新生血管的治疗效果。目的:PHD2对氧致小鼠视网膜病变(OIR)动物模型新生血管形成的影响。方法:40只7d龄的C57BL/6J幼鼠随机分为4组,正常对照组、高氧组及300mg/kg、500mg/kg PHD2抑制剂处理组。后3组放入动物氧舱,在(75±2) %的高氧环境中连续饲养5d,正常对照组于正常空气环境中饲养。处理组在结束高浓度给氧后,立即给予腹腔注射不同剂量的PHD2抑制剂(黄芩素),每天1次,连续5d,高氧组和正常对照组给予生理盐水腹腔注射。于出生第17d时处死小鼠,行Western blot和视网膜铺片, H-E染色后计数突破内界膜的内皮细胞核数目,免疫组化检测视网膜a-SMA和VEGF蛋白的表达。结果:Western blot显示视网膜存在PHD2表达,且高氧组蛋白表达量明显高于正常对照组(P<0.05)。视网膜铺片显示高氧组中央部视网膜有毛细血管无灌注区,视网膜新生血管形成,动静脉均迂曲、扩张; 300mg/kg及500mg/kg PHD2抑制剂处理组较高氧组明显改善。突破视网膜内界膜的内皮细胞核数目,正常对照组、高氧组、300mg/kg和500mg/kgPHD2处理组分别为0.6±0.84、39.4±5.17、15.8±1.93和6.3±1.57个,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),高氧组最多,正常对照组最少。免疫组化显示300mg/kg和500mg/kgPHD2抑制剂处理组a-SMA表达较高氧组明显增加;高氧组、300mg/kg及500mg/kgPHD2抑制剂处理组的VEGF表达较正常对照组明显增强, 300mg/kg和500mg/kgPHD2抑制剂处理组与高氧组比较,VEGF表达量无明显降低。结论:视视网膜存在PHD2表达,抑制其表达后能有效改善缺氧所致小鼠视网膜血管异常,提示PHD2可能在其发病机制中具有一定的作用。