【摘 要】
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油茶炭疽病、软腐病和茶籽霉烂是目前油茶种植以及采后储藏过程中发生的重要病害。当前对这些病害的防治以化学农药为主,但化学农药存在易产生抗药性、污染环境等问题。内生菌在与宿主协同进化过程中形成了互惠共存关系,具有易定殖、抑制病原菌生长、促进植物生长、提高植物存活率等能力。因此利用内生菌防治油茶重要病害具有较大的发展潜力。本研究以湖南、广西、江西、海南四省油茶为实验材料,从油茶组织（根、叶）中分离筛选具
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油茶炭疽病、软腐病和茶籽霉烂是目前油茶种植以及采后储藏过程中发生的重要病害。当前对这些病害的防治以化学农药为主,但化学农药存在易产生抗药性、污染环境等问题。内生菌在与宿主协同进化过程中形成了互惠共存关系,具有易定殖、抑制病原菌生长、促进植物生长、提高植物存活率等能力。因此利用内生菌防治油茶重要病害具有较大的发展潜力。本研究以湖南、广西、江西、海南四省油茶为实验材料,从油茶组织（根、叶）中分离筛选具有抑菌促生功能的内生菌,并初步分析其促生抑菌机理,主要研究结果如下:（1）采用组织研磨法从湖南长沙、湖南攸县、江西分宜、广西南宁、海南澄迈健康油茶组织中（叶子与根）,共分离出内生菌155株,其中根部95株,叶部60株。采用培养基平板对峙法,筛选出对果生炭疽菌（Colletotrichum fructicola）、油茶伞菌孢（Agricodochium.camelliae.）、青霉（Penicillium sp.）具有抑制作用的内生菌60株。41株内生菌对果生炭疽菌具有拮抗作用,其中AG-5抑菌率最高,为80.39%;13株内生菌对油茶伞菌孢具有拮抗作用,其中AY-14抑菌率最高,为76.43%;6株内生菌对青霉具有抑菌作用,其中AG-10抑菌率最高,为66.97%。对内生菌发酵液的抑菌效果进行测定表明这60株内生菌发酵液对3种病原菌具有同样抑菌效果。（2）对60株内生菌进行固氮、解磷、解钾、分泌植物生长素（IAA）能力测定。筛选出具固氮能力的内生菌28株,菌株AY-3固氮酶活性最高,为25.14 U/L;具溶无机磷能力的内生菌16株,菌株AG-14溶磷量最高,为1.401μg/mL;具溶有机磷能力的菌株18株,菌株AG-5的溶磷量最高,为1.299μg/mL;具解钾能力的菌株18株,其中菌株AG-4解钾效率最高,为61.06%。可分泌IAA的菌株29株,菌株AG-15上清中IAA的含量最高,为54.19 mg/L。结合拮抗实验筛选出六株优良抑菌促生内生菌分别是AG-5、AG-10、AG-15、AY-2、AY-5、AY-14。（3）对效果优良的抑菌促生内生菌AG-5、AG-10、AG-15、AY-2、AY-5、AY-14进行形态学、生理生化和分子鉴定。结果表明菌株AY-2、AY-5、AG-5为芽孢杆菌属（Bacillus）,菌株AG-10、AG-15、AY-14为梭形芽孢杆菌属（Lysinibacillus）。（4）对6株内生菌进行抑菌机理和诱导抗性研究。结果表明:拮抗促生内生菌AG-5、AG-10、AG-15、AY-2、AY-5、AY-14分别能使果生炭疽菌、油茶伞座孢、青霉菌丝发生扭曲、膨胀,影响菌丝的正常生长。经拮抗促生内生菌处理的病原菌菌丝体内可溶性蛋白含量减少、丙酮酸的生成受到抑制并使病原菌菌丝内的还原糖含量减少。在诱导作用下,油茶植株内的SOD、POD、CAT酶活性都有显著提高。
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