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研究背景：肝纤维化是对慢性肝损伤的创伤愈合反应,是慢性肝病共有的病理基础。肝脏内细胞外基质(ECM)的过度沉积是肝纤维化的重要特征,肝星状细胞(HSC)的活化增殖在肝纤维化的发生发展过程中占据主导地位,是ECM的主要来源,而转化生长因子β1(TGFβ1)是介导该过程重要的细胞因子。近年来研究表明肝纤维化是可以逆转的,但目前对于其治疗尚有许多不足之处。胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBPrP1)是一种分泌性糖蛋白,导师刘立新等的前期研究发现：肝纤维化及肝硬化患者肝组织中IGFBPrP1的表达明显增强；TGFβ1可诱导HSC中IGFBPrP1的表达增强,抗IGFBPrP1抗体可减少TGFβ1诱导的HSC合成过多Ⅰ型胶原；IGFBPrP1可使体外培养的HSC合成FN增加,抗IGFBPrP1抗体能够抑制HSC的活化增殖并促进其凋亡；硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导的小鼠肝纤维化中IGFBPrP1的表达明显上调。为了明确抗IGFBPrP1抗体能否预防TAA诱导的小鼠肝纤维化的形成,并探讨其机制,设计了本课题。目的：明确抗IGFBPrP1抗体能否预防硫代乙酰胺(TAA)诱导的小鼠肝纤维化的形成,同时探讨其机制。方法：将24只雄性C57BL/6野生型小鼠按随机数字表法分为3组：正常对照组(8只),腹腔注射等量磷酸盐缓冲液；TAA4周组(8只),腹腔注射TAA,200mg/kg,每周3次,持续4周；TAA+抗IGFBPrP1抗体4周组(8只),腹腔注射TAA,200mg/kg,每周3次,同时腹腔注射抗IGFBPrP1抗体,200μg/kg,每周7次,持续4周。4周末处死各组小鼠,采集肝组织。行HE染色和苦味酸-天狼星红染色观察肝组织形态学改变及胶原沉积情况；免疫组织化学染色检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGFβ1)、Smad3、p-Smad2/3和Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)的表达和分布；Western blot检测TGFβ1、Smad3、p-Smad2/3、纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)及IGFBPrP1的表达,并对上述指标进行相关性分析。结果：(1) HE染色和苦味酸-天狼星红染色：TAA4周组肝组织损伤严重,胶原面积较正常对照显著增多(2.53%±0.27% vs 0.09%±0.01%,F=487.855,P<0.01)；TAA+抗IGFBPrP1抗体4周组与TAA4周组相比,肝损伤减轻,胶原面积明显减少(0.63%±0.06% vs 2.53%±0.27%,F=487.855,P<0.01)。(2)免疫组织化学染色：α-SMA、TGFβ1、Smad3、p-Smad2/3及CollagenⅢ的表达在正常对照组表达较少,TAA4周组阳性表达明显高于正常对照组(1.59±0.33 vs0.17±0.05,F=89.382,P<0.01；9.09±0.54 vs 0.45±0.07,F=974.991,P<0.01；5.08±0.24vs 0.40±0.06,F=1562.605,P<0.01；4.81±0.24 vs 0.45±0.05,F=813.083,P<0.01；8.07±0.68 vs 0.47±0.06,F=475.230,P<0.01)；TAA+抗IGFBPrP1抗体4周组阳性表达较TAA4周组明显降低(0.69±0.16 vs 1.59±0.33,F=89.382,P<0.01；1.80±0.49 vs9.09±0.54,F=974.991,P<0.01；3.22±0.16 vs 5.08±0.24,F=1562.605,P<0.01；3.59±0.30vs 4.81±0.24,F=813.083,P<0.01：4.57±0.51 vs 8.07±0.68,F=475.230,P<0.01)。(3)免疫组织化学染色相关性分析：各组小鼠肝组织中CollagenⅢ的表达变化与α-SMA (r=0.943,P<0.01)、TGFβ1 (r=0.885, P<0.01)、Smad3 (r=0.989, P<0.01)及p-Smad2/3 (r=0.964,P<0.01)的表达变化成正相关。(4) Western blot检测：TAA4周组TGFβ1、Smad3、p-Smad2/3、FN、CollagenⅠ及IGFBPrP1蛋白的表达明显高于正常对照组(0.61±0.07 vs 0.33±0.04,F=29.807,P<0.01；0.98±0.06 vs 0.42±0.04,F=82.515,P<0.01；0.85±0.05 vs 0.47±0.03,F=73.212,P<0.01；0.84±0.06 vs 0.38±0.03,F=95.820,P<0.01：1.54±0.11 vs 0.65±0.04,F=115.671,P<0.01；1.70±0.12 vs 0.47±0.05,F=221.308,P<0.01)；TAA+抗IGFBPrP1抗体4周组上述蛋白的表达较TAA4周组明显降低(0.45±0.04 vs 0.61±0.07,F=29.807,P<0.01；0.68±0.08 vs 0.98±0.06,F=82.515,P<0.01：0.64±0.05 vs 0.85±0.05,F=73.212,P<0.01；0.49±0.05 vs 0.84±0.06,F=95.820,P<0.01；0.85±0.09 vs 1.54±0.11,F=115.671,P<0.01：0.69±0.08 vs 1.70±0.12,F=221.308,P<0.01)。(5) Western blot检测相关性分析：各组小鼠肝组织IGFBPrP1的表达变化与TGFβ1(r=0.901, P<0.01)、Smad3 (r=0.926, P<0.01)、p-Smad2/3 (r=0.916, P<0.01)、FN(r=0.987,P<0.01)及CollagenⅠ(r=0.960, P<0.01)的表达变化成正相关。结论：抗IGFBPrP1抗体可预防TAA诱导的小鼠肝纤维化的形成,其机制为抑制HSC的活化,减少细胞核内p-Smad2/3的表达来抑制TGFβ1/Smad3信号通路,进而导致细胞外基质在肝组织中沉积减少。