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目的：慢性粒细胞白血病(CML)是骨髓造血干细胞恶性克隆增生性疾病，约95％CML可发生t(9；22)(q34；q11)基因易位，形成bcr-abl融合基因，bcr-abl融合基因编码的蛋白具有升高酪氨酸激酶活性，在CML的病理过程中起重要作用。我们应用LightCycler技术建立一种快速、可靠的实时定量RT-PCR(RQ-PCR)检测bcr-abl mRNA的方法，并探讨RQ-PCR在CML诊断、疗效评价和骨髓移植(BMT)后微小残留疾病(MRD)动态监测中的作用。 方法：通过设计引物使同一PCR反应管内可扩增b3a2、b2a2、ela2几种常见的bcr-abl转录本和b3a3、b2a3等少见转录本。LightCycler探针设计与abl外显子a3互补，可同时用于bcr-abl和abl转录本的定量检测。建立RQ-PCR方法并对其主要要素进行优化，评价优化后RQ-PCR的敏感性、特异性和可靠性。将重组质粒系列十倍比稀释后绘制标准曲线。并应用已建立的RQ-PCR方法检测38例共45份不同临床分期(慢性期25份，加速期6份，急变期14份)CML病人外周血中bcr-abl的水平。 结果：建立了RQ-PCR检测bcr-abl mRNA的方法，该法可检出10~5健康人单个核细胞中的1个K562细胞，最低可检出100个拷贝bcr-abl分子。bcr-abl和abl的CT值(拷贝数)批内变异系数分别为0.68％(12.93％)和0.59％(8.60％)，批间变异系数分别为1.14％(18.89％)和1.01％(12.72％)。应用RQ-PCR检测慢性期CML病人的bcr-abl和bcr-abl／abl比率分别为(11542±5106)拷贝／μg总RNA和(10.58±5.12)％，加速划分别为(83350±7844)拷贝／μg总RNA和(84.20±3.78)％，急变期分别为(79112±7956)拷贝／μg总RNA和(80.15±4.16)％。对一例BMT后和一例诊断为加速期的CML病人应用格列卫治疗进行bcr-abl转录本的动态检测，表明RQ-PCR的结果与CML临床分期密切相关。结论:我们建立了一种实时荧光定量l〕CR检测l〕Cr一abl mRNA的方法，可作为CML诊断、疗效判断和BM尸r后MRD监测的灵敏可靠的方法，ber一abl/abl比率与CMLI愉床分期密切相关。