中药多被银莲花提取物抗肿瘤及免疫学调节作用的实验研究

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目的:研究中药多被银莲花提取物的体内外抗肿瘤作用、诱导肿瘤细胞凋亡作用和免疫调节作用及其作用机制,分离纯化出多被银莲花的活性成分。为抗肿瘤新药的开发、研制提供科学依据。方法: 1.采用MTT法分析多被银莲花提取物对人源性肿瘤细胞株BGC-823、K562、TE-13、MCF-7、SMMC-7721、SKOV-3和鼠源性肿瘤细胞株S180增殖反应的抑制作用。2.采用逐步分离法对多被银莲花抗肿瘤活性成分进行分离与纯化。采用柱层析和高效液相色谱法进行分离、纯化,应用薄层层析和电喷质谱分析进行成分鉴定。3.于小鼠右腋皮下接种S180肿瘤细胞,建立荷瘤小鼠动物模型,通过灌胃法投入多被银莲花提取物治疗荷瘤小鼠,观察多被银莲花提取物对荷瘤小鼠肿瘤形成情况以及小鼠生存期的影响。4.以体外对多被银莲花提取物抑瘤效果比较明显的肝癌细胞株SMMC-7721为研究对象,采用Gimsa染色技术、透射电镜观察、流式细胞技术、DNA提取及琼脂糖凝胶电泳技术测定及其检测了中药多被银莲花提取物诱导肿瘤细胞凋亡的作用。用半定量RT-PCR技术从mRNA水平研究多被银莲花提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡前后细胞bcl-2、bax、survivin等基因表达水平的变化,分析多被银莲花提取物诱导
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