Aβ1-40诱导老年痴呆大鼠海马凋亡相关基因bcl-2,Bax的表达及其干预的实验研究

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目的:研究β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)对大鼠空间学习记忆能力、海马区bcl-2和Bax表达的影响及小脑顶核电刺激(Fastigial nucleus stimulation,FNS)的干预作用。方法:成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只,随机分为假手术组(SC组)、AD模型组(AD组)、AD模型+电刺激小脑顶核干预组(FNS组)和AD模型+电刺激小脑齿状核干预组(DNS组)。将Aβ1-40微量注射至大鼠右侧海马,制作大鼠AD动物模型,分别予电刺激小脑顶核、齿状核。造模后28天,采用Morris水迷宫法测定大鼠空间学习记忆能力,然后通过HE染色进行病理观察海马神经细胞的形态,免疫组织化学法检测Bax、bcl-2蛋白表达情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Bax、bcl-2mRNA的表达情况。结果:(1)行为学改变:AD组与SC组比较,每天隐匿平台逃避潜伏期均明显增长(P<0.05),FNS组与AD组比较,空间学习记忆能力明显改善(P<0.05),DNS组与AD组比较,空间学习记忆能力未见明显改善(P>0.05)。(2)免疫组织化学检测结果:SC组海马区bcl-2阳性细胞平均光密度为0.27±0.05,AD组(0.20±0.04)较SC组海马区bcl-2阳性细胞平均光密度明显减少(P<0.05),而FNS组(0.37±0.10)bcl-2阳性细胞平均光密度较AD组和SC组均明显增高(P<0.05);DNS组(0.19±0.04)与AD组比较差异无统计学意义(P>0.05)。SC组海马区Bax阳性细胞平均光密度为0.26±0.06,AD组(0.67±0.06)较SC组海马Bax阳性细胞平均光密度明显增高(P<0.05),FNS组(0.43±0.07)Bax阳性细胞平均光密度较SC组增高,且差异有统计学意义(P<0.05),但较AD组和DNS组均明显降低(P<0.05);DNS组(0.68±0.09)与AD组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)RT-PCR检测结果:SC组bcl-2 mRNA表达相对强度为0.3153±0.0110,与SC组相比,AD组(0.1938±0.0087)、DNS组(0.1938±0.0136)bcl-2 mRNA表达相对强度降低(P<0.05),FNS组(0.3823±0.0158)与各组比较bcl-2 mRNA表达相对强度升高(P<0.05);SC组Bax mRNA表达相对强度(0.3505±0.0072),AD组(0.5843±0.0145)、DNS组(0.5682±0.0101)和FNS组(0.3950±0.0070)Bax mRNA表达相对强度均较SC组增高,差异具有统计学意义(P<0.05),FNS组与AD组比较Bax mRNA表达相对强度明显降低(P<0.05),DNS组与AD组比较Bax mRNA表达相对强度无显著性差异(P>0.05)。结论:FNS干预可部分改善Aβ1-40诱导的AD模型大鼠空间学习记忆障碍,可能的机制是通过促进海马区bcl-2表达和降低Bax表达抑制海马神经细胞凋亡。
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