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我国是全球22个结核病高负担国家之一,通过研究不同方法制备的中药复方牛贝消核(NiuBeiXiaoHe,NBXH)提取物的体内外抗菌活性,为制备抗结核中成药制剂提供实验基础。一、中药复方NBXH两种提取物的体外抑菌作用制备分别含50、100、150和200 mg.mL-1 NBXH水提取物、醇提取物的改良罗氏培养基,并分别制备含1、10μg.ml-1异烟肼(Isoniazide,INH)和50、250μg.mL利福平(Rifampicin,RFP)的改良罗氏培养基为对照,将5株耐多药结核分枝杆菌(Multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-M.tb)分离株、牛结核分枝杆菌和13株非结核分枝杆菌(Non-tuberculous mycobateria,NTM)分别接种于含药的改良罗氏培养基中,置37℃培养4周,测定其最低抑菌浓度(MICs)。结果显示NBXH水提取物对5株MDR-M.tb分离株(No.13424、No.13420、No.13449、No.13451、No.13445)、牛结核分枝杆菌及胞内、瘰疬、母牛和偶然分枝杆菌的MICs均为200mg.mL-1,对草、耻垢、戈登、堪萨斯和胃分枝杆菌的MICs均为100mg.mL-1,对鸟分枝杆菌的MIC为150mg.mL-1;NBXH醇提取物对4株MDR-M.tb分离株(No.13420、No.13449、No.13451、No.13424)及胞内、瘰疬、偶然、脓肿、龟分枝杆菌的MICs均为200mg.mL-1,对1株MDR-M.tb分离株No.13445和牛结核分枝杆菌的MIC为150mg.mL-1,对母牛、耻垢、鸟、胃和猿分枝杆菌的MICs均为100mg.mL-1,对草、戈登和堪萨斯分枝杆菌的MICs均为50mg.mL-1。NBXH水提取物和醇提取物对敏感或耐药的M.tb和NTM均有不同程度的抑制作用,醇提取物的抗菌活性比水提取物略强。二、中药复方NBXH提取物体内抗菌作用选取160只体重17-19g的6-8周龄的雌性BALB/c小鼠,8只小鼠作为正常对照组,其余152只小鼠以5×104CFUs的M.tb H37Rv标准株菌悬液通过尾静脉攻击建立结核病模型。将感染小鼠称重后,随机均匀地分为19组,每组8只。感染后第3天开始进行分组治疗:未治疗对照组、inh组、微卡组、nbxh1号中剂量组、nbxh1号高剂量组、nbxh2号中剂量组、nbxh2号高剂量组、nbxh3号中剂量组、nbxh3号高剂量组、nbxh4号中剂量组、nbxh4号高剂量组、nbxh1号中剂量+inh组、nbxh1号高剂量+inh组、nbxh2号中剂量组+inh组、nbxh2号高剂量组+inh组、nbxh3号中剂量+inh组、nbxh3号高剂量+inh组、nbxh4号中剂量+inh组、nbxh4号高剂量+inh组。以成人临床给药有效剂量为标准按体重换算小鼠给药量,中药和inh(0.4mg/只/天)除周六日外一周灌药5次,灌胃容积为0.5ml,连续灌胃给药13周;微卡组肌肉注射微卡菌苗(22.5μg/100μl),1次/2周,共6次。观察小鼠一般状况,每周体重增长情况,治疗13周杀鼠后计算肺肝脾脏器指数,肺组织菌落计数,了解nbxh对小鼠结核病的治疗效果。经过13周治疗,与未治疗对照组比较,inh组、微卡组、nbxh1号中高剂量组、nbxh2号中高剂量组、nbxh3号中剂量组、nbxh1号中高剂量+inh组、nbxh2号高剂量+inh组、nbxh3号中高剂量+inh组和nbxh4号中剂量+inh组小鼠体重均显著增加(p<0.05);与未治疗对照组比较,inh组、微卡组、nbxh1号中剂量组、nbxh2号中剂量组、nbxh3号中高剂量组、nbxh4号中剂量组、nbxh1号中高剂量+inh组、nbxh2号中高剂量+inh组、nbxh3号高剂量+inh组、nbxh4号中高剂量+inh组小鼠肺脏器指数均显著降低(p<0.05);与未治疗对照组比较,inh组、nbxh2号中高剂量组、nbxh3号高剂量组、nbxh4号高剂量组、nbxh2号中高剂量+inh组、nbxh4号中剂量+inh组肝脏器指数均显著降低;与未治疗对照组比较,inh组、nbxh3号中高剂量组、nbxh4号中高剂量组、nbxh1号中高剂量+inh组、nbxh2号高剂量+inh组、nbxh3号中高剂量+inh组、nbxh4号中剂量+inh组脾脏器指数均显著降低;与未治疗对照组比较,inh治疗组,nbxh1号高剂量组,nbxh2号中剂量组,nbxh4号高剂量组,nbxh1号、nbxh2号、nbxh3号、nbxh4号中药与inh联合组肺菌落计数均显著降低(p<0.05)。不同方法制备的nbxh复方提取物在体内对小鼠TB模型有不同程度的治疗效果,可改善小鼠TB模型的一般状况,减轻其病变程度,减少脏器菌落数;NBXH2和NBXH1方法制备的提取物较NBXH3和NBXH4的抗结核作用好;部分联合治疗组在体重增长、肺脏器指数、脾脏器指数及肺菌落计数方面较单用中药组有较好的治疗效果,但大部分联合治疗组与单用化药组无显著差异。