论文部分内容阅读
榛为桦木科(Betulaceae)榛属(Corylus)植物，主要分布于我国河北、山东、河南、陕西等地，我国榛的野生资源丰富，其中以平榛(Corylus heterophylla Fisch.)分布较多且较普遍。平榛叶中含有丰富的黄酮类化合物，但是对于平榛叶黄酮的研究少见报道，希望通过对平榛叶黄酮的成分及抗氧化活性等方面的研究，为开发、利用平榛叶资源提供一定的理论基础。本课题包括四个部分：（1）利用微波辅助提取法提取平榛叶中的黄酮类化合物，对微波提取平榛叶黄酮的工艺条件（乙醇浓度、料液比、微波温度、微波功率及提取时间）进行了研究，实验结果表明，微波提取平榛叶黄酮的最佳工艺条件为：乙醇浓度为55%，料液比为1:35(g: mL)，微波温度为80℃，微波功率为300W，提取时间为5min。（2）通过静态吸附和解吸实验，从八种大孔树脂中筛选出了适合用于纯化平榛叶黄酮的树脂类型，确定了D101型大孔树脂是分离纯化平榛叶黄酮的最佳树脂。同时，通过动态实验对样品液流速、样品液pH、解析液pH、解析液乙醇浓度和解析液体积对D101型大孔树脂的纯化效果进行了研究，确定了D101型大孔树脂纯化平榛叶黄酮的最佳工艺参数为：样品液流速2BV/h、样品液pH值4、解吸液pH值4，解吸液乙醇浓度为70%，解吸液体积为3BV。在此条件下，纯化后的平榛叶黄酮纯度提升至57.4%。（3）利用高效液相色谱-质谱（HPLC-MS/MS）分析方法，对平榛叶黄酮成分进行了定性、定量分析。共从中鉴定出12种化合物，其中11种为首次从平榛叶中发现，分别为表儿茶素（41.45±1.87μg/g）、绿原酸（3-咖啡酰奎宁酸，389.00±17.15μg/g）、丁香亭-3-O-葡萄糖苷（6169.78±209.73μg/g）、丹酚酸C（443.37±21.07μg/g）、金圣草黄素-6-C-葡萄糖苷（206.81±10.07μg/g）、金丝桃苷（槲皮素-3-O-半乳糖苷，154.44±7.63μg/g）、槲皮苷（槲皮素-3-O-鼠李糖苷，937.15±40.86μg/g）、西伯利亚落叶松黄酮-3-O-半乳糖苷（17.27±0.82μg/g）、锦葵色素-3-O-葡萄糖苷（202.74±10.04μg/g）、西伯利亚落叶松黄酮-3-O-葡萄糖苷（101.27±4.99μg/g）和山奈酚-3-O-鼠李糖苷（112.37±4.77μg/g）。（4）利用细胞模型法对平榛叶黄酮的细胞内抗氧化活性进行了研究，结果表明，平榛叶黄酮不仅对HT-29和RAW264.7细胞的生长没有影响，而且具有良好的抗氧化能力，对HT-29和RAW264.7细胞内的活性氧（ROS）清除效果明显。此外，通过化学法对比平榛叶黄酮和人工抗氧化剂Vc的总抗氧化活性和清除自由基的能力，发现平榛叶黄酮在总抗氧化活性、清除超氧阴离子和清除DPPH自由基的能力劣于Vc，在清除羟自由基和抑制卵黄脂蛋白脂质氧化方面优于Vc。