“菌毒炎并治”调控脓毒症大鼠基因表达机制的实验研究

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目的观察脓毒症时基因的异常表达,探索菌毒炎并治调控脓毒症大鼠基因表达的内在机制,揭示拆分中药组方中的单味中药连翘的作用靶点,探讨将菌毒炎并治的治疗剂型变成针剂的可行性。为临床治疗脓毒症筛选有效药物。方法通过盲肠结扎穿孔术复制脓毒症动物模型,将140只大鼠随机分为5组(空白组10只,模型组40只,抗生素组30只,连翘组30只,菌毒炎并治组30只)。术后正常饮食,自由饮水。模型组(M)腹腔给予生理盐水10ml/kg,给药时间与治疗组相同。抗生素组(K)制模后,腹腔注射泰能0.1g/kg,血必净注射液10ml/kg(由天津市红日药业股份有限公司提供),每日2次。菌毒炎并治组(JDY)制模后腹腔注射抗生素(泰能)0.18g/kg、血必净注射液10ml/kg、凉膈散(自制中药复方煎剂)3m1/100g(药物浓度:3g/m1)灌胃,每日2次。连翘组(L)制模后腹腔注射泰能0.1g/kg、血必净注射液10ml/kg、连翘注射液10ml/kg(由天津市红日药业股份有限公司提供)。于治疗后72小时全部处死,无菌条件下取右上叶肝组织,于液氮中保存备用。用一步法总RNA提取试剂(Trizol)抽提液氮中肝组织总RNA。观察比较各组大鼠的基因芯片表达图谱结果。结果菌毒炎并治组、抗生素组、连翘组所检出已知功能的差异表达基因数分别为28、15、35,其中分别上调4、2、15,下调24、13、20个基因。结论菌毒炎并治组、抗生素组、连翘组均对脓毒症时发生紊乱的免疫、物质代谢与运输、细胞周期与增殖、细胞凋亡、信号转导、转录调节、细胞附着、细胞骨架等相关基因进行调控,使其异常表达基因发生回归,调节各系统之间的平衡。本实验研究显示:抗生素治疗方案对模型组中已知功能的物质运输、细胞凋亡、细胞骨架、转录调节、细胞附着等相关基因的异常表达的回归调节未检测出;菌毒炎并治方案及连翘方案在已检测出的各功能分类的异常表达基因中均有较好回归调节,从基因水平上使脓毒症病情得到良好的转归。前者在调节半乳糖苷凝集素3、空泡蛋白分选24同系物、阀蛋白1、整连蛋白αX等基因上较其他两组有优势,后者在三磷酸腺苷酶、超氧化物歧化酶2、溶质传递族25、杆状病毒3、维甲酸诱导1、嗅觉感受器59等基因上较其他两组有优势。
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