羟基红花黄色素A提取、精制及稳定性研究

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红花(Carthamus tinctorius L.)系菊科红花属红花的干燥花,是活血化淤的传统中药。研究表明,红花具有扩血管、降血压、降血脂、抗凝血、抗炎和提高抗缺氧能力等作用。在现代医学中是预防和治疗冠心病、心肌梗死和脑血栓等中老年疾病的重要中药。红花中起活血化淤作用的主要成分是红花黄色素(SY),红花黄色素的主要成分为羟基红花黄色素A(HSYA)。羟基红花黄色素A的含量对红花的药效有着直接影响,而目前文献报道的关于分离提纯羟基红花黄色素A的方法都有待改进。为此,本实验研究了羟基红花黄色素A提取、精制方法。该法方法简单,成本低,无污染,同时可为生产应用提供理论指导。此外,红花黄色素还是一种很有价值的天然食用色素,是各种清凉饮料,糕点,糖果,各类食品和化妆品的理想着色剂,因此具有很高的实用价值和开发前景。而红花黄色素特殊的结构特征,决定了其性质的独特,从而影响其稳定性。因此,利用高效液相色谱法,研究光、温度、pH、金属离子、以及稳定剂对红花黄色素溶液稳定性的影响。本论文主要对羟基红花黄色素A的提取工艺、分离纯化、稳定性等方面进行了研究,具体工作主要有以下几个方面:1、利用正交实验,以羟基红花黄色素A的含量为评价指标,确定了从红花中提取红花黄色素的最佳提取工艺。浸提的最佳工艺条件是:温度为60℃,提取时间45min,次数2次,加水量为30倍,提取液中红花黄色素的含量为14.2mg/g(每克红花药材中含羟基红花黄色素A14.2 mg)。2、利用大孔吸附树脂初步纯化羟基红花黄色素A的研究。本方法有如下优点:(1)应用大孔吸附树脂分离红花黄色素的同时,还可除去大量杂质。(2)所用的淋洗剂为水和乙醇,毒性小,价格低廉。(3)大孔吸附树脂有其独特的优点,易于洗脱再生,有益于多次利用。3、对羟基红花黄色素A的精制研究发现:新树脂M的洗脱分离效果好,该树脂分离效果与ODS-C18相当,但使用寿命更长,化学稳定型更好,样品负载量更大,且耐强酸、耐强碱、适合多种有机溶剂和水溶液介质。吸附速度快、应用范围广,特别适合植化分离,微量高纯物质制备,可多次重复使用,宜于大工业化生产。用该树脂吸附分离2次,用一定浓度的乙醇进行洗脱,纯度可达到80%以上。4、研究了温度、光照、抗坏血酸、EDTA、微量金属离子及pH值对红花黄色素稳定性的影响。结果显示:光照和温度对红花黄色素的稳定性影响比较大;在酸性条件下,温度对红花黄色素的稳定性影响较小;在碱性条件下,热稳定性差。当温度高于60℃,加热一定时间后,HSYA发生了水解。在避光条件下,红花黄色素有较好的稳定性。Fe2+和Fe3+对红花黄色素的含量都有不同程度的影响,微量的EDTA和抗坏血酸,可明显的提高红花黄色素的稳定性。
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