丘脑前核在三叉神经电刺激减轻癫痫发作和海马神经元损伤中的作用

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目的:三叉神经电刺激(TNS)在动物模型和临床试验中已被证实具有抗癫痫及神经元保护作用,但是三叉神经电刺激(TNS)在减轻由匹罗卡品所致的慢性癫痫大鼠癫痫发作程度,海马神经元凋亡,变性及脱失的机制仍不明确。我们实验组通过立体定向毁损丘脑前核,观察丘脑前核在三叉神经电刺激(TNS)减轻癫痫发作和海马神经元损伤中的作用并探讨其可能的抗癫痫机制。方法:健康雄性SD大鼠随机平均分为正常对照组(Control group,n=20),实验组(Pilo group,n=25 TNS group,n=25 ATN group,n=25)。实验组大鼠经腹腔注射匹罗卡品建立癫痫持续状态(SE),SE后30min,腹腔注射地西泮(10mg/kg)终止发作;视频监视大鼠一个月,观察其自发性癫痫发作情况,确定具有自发反复性发作的慢性癫痫模型。慢性癫痫模型各组分别给予三叉神经假刺激处理、三叉神经电刺激和立体定向毁损丘脑前核预处理后三叉神经电刺激1月,再次腹腔注射匹罗卡品诱导癫痫发作,观察大鼠的癫痫级别分数及持续时间。余下的大鼠分别于不同的时间点(24h,48h,72h,1w)进行断头取脑,并通过TUNEL,FJB染色和Nissl染色观察大鼠海马CA1区及CA3区海马神经元的凋亡、变性及脱失情况。结果:1.三叉神经电刺激减轻癫痫发作,而毁损丘脑前核后其抗癫痫作用被减弱:与未经三叉神经电刺激的Pilo组大鼠相比,TNS组大鼠癫痫发作的级别分数及持续时间明显降低(P<0.05);与未经毁损丘脑前核的TNS处理大鼠相比,毁损丘脑前核后的TNS处理大鼠癫痫发作的级别分数及持续时间明显增加(P<0.05)。2.三叉神经电刺激抑制癫痫大鼠海马神经元的凋亡,变性及脱失,而毁损丘脑前核后其神经元保护作用被减弱。与未经三叉神经电刺激的Pilo组大鼠相比,TNS组大鼠癫痫发作海马TUNEL,FJB阳性细胞及细胞的脱失数目明显减少,(P<0.05);与未经三叉神经电刺激的TNS组相比,毁损丘脑前核后的TNS处理大鼠癫痫发作后海马TUNEL,FJB阳性细胞及细胞的脱失较TNS组显著增加(P<0.01)。结论:三叉神经电刺激能减轻慢性癫痫大鼠的癫痫发作,并能减轻癫痫所致的海马神经元损伤;毁损丘脑前核后,TNS减轻癫痫发作及海马神经元损伤的作用被显著降低,表明丘脑前核在TNS抗癫痫中发挥一定的作用;潜在机制可能是TNS通过丘脑前核慢性激活丘脑与大脑皮层的纤维联系,使海马神经元兴奋性易感性改变。
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