益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠TLR4/NF-kB信号通路调控机制

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gongjuntao
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目的:本实验探讨了益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠TLR4/NF-kB信号通路调控作用及机制,为益肝胶囊临床治疗免疫性肝损伤提供实验依据。方法:健康雄性小鼠40只,随机分成5组:正常组,模型组,益肝胶囊低、中、高剂量组。益肝胶囊低、中、高剂量组进行灌胃给药治疗,每日一次,连续给药14天。末次给药1小时后,除正常组外,其余各组小鼠尾静脉注射刀豆蛋白A(ConA)复制免疫性肝损伤模型。ConA尾静脉注射8h后进行各组小鼠取材,检测血清中ALT、AST水平;HE染色观察肝脏病理形态变化;酶联免疫法测血清中的I L-1 β、IL-2、I L-8水平;免疫组化法检测TLR4、MyD88、NF-kBP65、Caspase-3 蛋白表达。结果:1.与正常组相比,模型组ALT、AST水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,益肝胶囊高、中、低剂量组ALT、AST水平均有不同程度的降低(P<0.01),特别是益肝胶囊高剂量组降低ALT、AST水平更加明显。2.模型组肝细胞气球样变,肝板模糊,肝细胞排列紊乱,肝窦变宽,大量炎性细胞浸润,可见灶性坏死。与模型组相比,益肝胶囊高、中、低剂量组肝组织病理变化均不同程度改善,表现为肝细胞排列比较规整,炎性细胞浸润减少,肝细胞变性减轻。3.与正常组比较,模型组血清中IL-1 β、IL-2、IL-8水平均不同程度增高(P<0.01)。与模型组相比较,益肝胶囊的高、中、低剂组血清IL-1 β、IL-2、I L-8水平均一定程度降低(P<0.01),特别是高剂量组对IL-1 β、IL-2、IL-8抑制效果最明显(P<0.01)。4.与正常组比较,模型组肝组织中TLR4、MyD88、NF-kBP65、Caspase-3蛋白表达均明显增多(P<0.01),与模型组比较,益肝胶囊高、中、低剂量组肝组织中TLR4、MyD88、NF-kBP65、Caspase-3蛋白表达均有不同程度减少(P<0.01)结论:1.益肝胶囊能够降低刀豆蛋白A所诱导的肝损伤小鼠的肝功能损害,改善肝脏的病理学变化,对免疫性肝损伤起到治疗作用。2.益肝胶囊能够调节免疫性肝损伤小鼠血清中IL-1β、IL-2、IL-8细胞因子水平。3.益肝胶囊能够调节免疫性肝损伤小鼠肝组织中TLR4、MyD88、NF-kBP65、Caspase-3 蛋白表达。综上,益肝胶囊可能通过TLR4/NF-kB信号通路,调控炎性细胞因子水平,从而对免疫性肝损伤起到治疗作用。
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