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目的：观察RAS拮抗剂对急慢性脑缺血大鼠脑组织VEGF、HIF-1α、TNF-α、ICAM-1、GFAP、LN、NeuN、AQP4的影响，探索对急慢性脑缺血神经血管单元的作用及机制。
方法：1，180只SPF级雄性SD大鼠，随机分为五组：假手术组、急性脑缺血模型组、阿利吉仑组、依那普利组和坎地沙坦组，各36只。再随机均分为24、72小时亚组，各18只。假手术组和急性脑缺血模型组，用蒸馏水1ml/100g每天灌胃。同时其余用药组用等量蒸馏水按照相应浓度配置每天灌胃。两周后行双侧颈总动脉夹闭术，同时阻断左右两侧血流，阻断大脑供血，两小时后解除阻断，恢复供血24和72小时造成急性脑缺血再灌注损伤。按照实验设计的不同时间节点，分别于取出动脉夹24和72小时，每组6只大鼠处死后断头取脑，取出脑组织通过TTC实验检测脑梗死程度;各组另外6只，麻醉后多聚甲醛灌注，灌注后断头取脑，完整组织用石蜡进行包埋，制作石蜡切片，行免疫组化法，检测GFAP、LN、NeuN、AQP4的水平;各组余下大鼠处死后断头取脑，每只大鼠左侧脑组织用冰0.9％氯化钠注射液制作10％匀浆，行ELISA检测，测定VEGF、HIF-1α、TNF-α的水平;右侧脑组织用预冷的PBS及裂解液制备匀浆，行Western Blot检测，测定ICAM-1水平。
2，50只SPF级雄性SD大鼠随机分为五组：假手术组(10只)、慢性脑缺血模型组（10只）、阿利吉仑组(10只)、依那普利组(10只)、坎地沙坦组(10只)。于不同时点分别用棉线结扎左右两侧颈总动脉，假手术组手术但不结扎血管。造模成功后，假手术组和慢性脑缺血模型组，用蒸馏水1ml/100g每天灌胃，同时三个用药组用等量蒸馏水按照相应浓度配置给药30天。灌胃结束后，运用Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力等行为学情况，麻醉后多聚甲醛灌注全身，灌注后断头取脑，石蜡包埋，制作石蜡切片，TUNEL凋亡染色及免疫组化法检测GFAP、LN、NeuN、AQP4的水平。
结果：实验1的TTC实验结果显示，假手术组未发现明显梗死。模型组大量白色脑梗死区域。对比24h、72h模型组，阿利吉仑24h、72h组，依那普利24h、72h组，及坎地沙坦24h、72h组梗死面积明显缩小，差异具有统计学意义(p＜0.05)。大鼠脑组织GFAP、LN、NeuN、AQP4水平检测结果表明，对比假手术组，24h、72h模型组GFAP、LN、NeuN、AQP4的水平显著降低，差异具有统计学意义(p＜0.05);对比24h、72h模型组，阿利吉仑24h组，依那普利24h、72h组，及坎地沙坦24h、72h组GFAP、LN、NeuN、AQP4水平明显升高，差异具有统计学意义(p＜0.05)。对比72h模型组，阿利吉仑72h的GFAP无明显变化，无统计学差异(p＞0.05)。大鼠脑匀浆VEGF、HIF-1α、TNF-α水平检测结果表明，对比假手术组，24h、72h模型组中VEGF、HIF-1α、TNF-α水平显著上升，差异具有统计学意义(p＜0.05);相比24h、72h模型组，阿利吉仑24h、72h组HIF-1α、TNF-α水平明显降低，差异具有统计学意义(p＜0.05)。而对比24h、72h模型组，阿利吉仑24h、72h组VEGF水平无明显变化，差异无统计学意义(p＞0.05)。依那普利24h、72h组，及坎地沙坦24h、72h组VEGF、HIF-1α、TNF-α水平明显降低，差异具有统计学意义(p＜0.05)。Western Blot结果显示，对比假手术组，24h、72h模型组ICAM-1表达水平明显上升，有统计学差异(p＜0.05);对比24h、72h模型组，阿利吉仑24h、72h组，依那普利24h、72h组，及坎地沙坦24h、72h组ICAM-1表达水平明显降低，差异具有统计学意义(p＜0.05)。
实验2前期Morris水迷宫实验发现：阿利吉仑、依那普利、坎地沙坦对慢性脑缺血大鼠空间记忆能力有明显改善作用，同时TUNEL凋亡染色表明能明显减少海马神经元凋亡减轻脑损伤。大鼠脑组织GFAP、LN、NeuN、AQP4水平检测结果表明，对比假手术组，模型组GFAP、LN、NeuN、AQP4表达水平明显降低，差异具有统计学意义（p＜0.05）;对比模型组，三用药组GFAP、LN、NeuN、AQP4的表达水平显著提高，有统计学差异(p＜0.05)。
结论：三种RAS拮抗剂均能降低急性脑缺血再灌注时脑梗死体积。依那普利和坎地沙坦能分别上调急性脑缺血后24h、72h的GFAP、LN、NeuN、AQP4的表达水平，下调了VEGF、HIF-1α、TNF-α及ICAM-1的表达水平。阿利吉仑分别上调急性脑缺血后24h、72h的LN、NeuN、AQP4的表达水平，下调了HIF-1α、TNF-α及ICAM-1的表达水平。阿利吉仑能上调急性脑缺血24h的GFAP水平，但对急性脑缺血72h的GFAP水平调节不明显，并且对急性脑缺血后24h、72h的VEGF水平调节也不明显。由此可以推测，RAS拮抗剂可通过上调GFAP、LN、NeuN、AQP4的表达水平，下调VEGF、HIF-1α、TNF-α及ICAM-1的表达水平，保护神经血管单元。但是肾素抑制剂对急性脑缺血再灌注的保护随着时间的延长，效果下降。RAS拮抗剂也能上调慢性脑缺血的GFAP、LN、NeuN、AQP4水平，表现出对慢性脑缺血神经血管单元的积极疗效。急慢性脑缺血后发生一系列损伤，RAS拮抗剂能降低神经元的凋亡，改善缺氧环境，保护星形胶质细胞，促进神经元的营养，减少脑血管的损伤，保护神经血管单元。
方法：1，180只SPF级雄性SD大鼠，随机分为五组：假手术组、急性脑缺血模型组、阿利吉仑组、依那普利组和坎地沙坦组，各36只。再随机均分为24、72小时亚组，各18只。假手术组和急性脑缺血模型组，用蒸馏水1ml/100g每天灌胃。同时其余用药组用等量蒸馏水按照相应浓度配置每天灌胃。两周后行双侧颈总动脉夹闭术，同时阻断左右两侧血流，阻断大脑供血，两小时后解除阻断，恢复供血24和72小时造成急性脑缺血再灌注损伤。按照实验设计的不同时间节点，分别于取出动脉夹24和72小时，每组6只大鼠处死后断头取脑，取出脑组织通过TTC实验检测脑梗死程度;各组另外6只，麻醉后多聚甲醛灌注，灌注后断头取脑，完整组织用石蜡进行包埋，制作石蜡切片，行免疫组化法，检测GFAP、LN、NeuN、AQP4的水平;各组余下大鼠处死后断头取脑，每只大鼠左侧脑组织用冰0.9％氯化钠注射液制作10％匀浆，行ELISA检测，测定VEGF、HIF-1α、TNF-α的水平;右侧脑组织用预冷的PBS及裂解液制备匀浆，行Western Blot检测，测定ICAM-1水平。
2，50只SPF级雄性SD大鼠随机分为五组：假手术组(10只)、慢性脑缺血模型组（10只）、阿利吉仑组(10只)、依那普利组(10只)、坎地沙坦组(10只)。于不同时点分别用棉线结扎左右两侧颈总动脉，假手术组手术但不结扎血管。造模成功后，假手术组和慢性脑缺血模型组，用蒸馏水1ml/100g每天灌胃，同时三个用药组用等量蒸馏水按照相应浓度配置给药30天。灌胃结束后，运用Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力等行为学情况，麻醉后多聚甲醛灌注全身，灌注后断头取脑，石蜡包埋，制作石蜡切片，TUNEL凋亡染色及免疫组化法检测GFAP、LN、NeuN、AQP4的水平。
结果：实验1的TTC实验结果显示，假手术组未发现明显梗死。模型组大量白色脑梗死区域。对比24h、72h模型组，阿利吉仑24h、72h组，依那普利24h、72h组，及坎地沙坦24h、72h组梗死面积明显缩小，差异具有统计学意义(p＜0.05)。大鼠脑组织GFAP、LN、NeuN、AQP4水平检测结果表明，对比假手术组，24h、72h模型组GFAP、LN、NeuN、AQP4的水平显著降低，差异具有统计学意义(p＜0.05);对比24h、72h模型组，阿利吉仑24h组，依那普利24h、72h组，及坎地沙坦24h、72h组GFAP、LN、NeuN、AQP4水平明显升高，差异具有统计学意义(p＜0.05)。对比72h模型组，阿利吉仑72h的GFAP无明显变化，无统计学差异(p＞0.05)。大鼠脑匀浆VEGF、HIF-1α、TNF-α水平检测结果表明，对比假手术组，24h、72h模型组中VEGF、HIF-1α、TNF-α水平显著上升，差异具有统计学意义(p＜0.05);相比24h、72h模型组，阿利吉仑24h、72h组HIF-1α、TNF-α水平明显降低，差异具有统计学意义(p＜0.05)。而对比24h、72h模型组，阿利吉仑24h、72h组VEGF水平无明显变化，差异无统计学意义(p＞0.05)。依那普利24h、72h组，及坎地沙坦24h、72h组VEGF、HIF-1α、TNF-α水平明显降低，差异具有统计学意义(p＜0.05)。Western Blot结果显示，对比假手术组，24h、72h模型组ICAM-1表达水平明显上升，有统计学差异(p＜0.05);对比24h、72h模型组，阿利吉仑24h、72h组，依那普利24h、72h组，及坎地沙坦24h、72h组ICAM-1表达水平明显降低，差异具有统计学意义(p＜0.05)。
实验2前期Morris水迷宫实验发现：阿利吉仑、依那普利、坎地沙坦对慢性脑缺血大鼠空间记忆能力有明显改善作用，同时TUNEL凋亡染色表明能明显减少海马神经元凋亡减轻脑损伤。大鼠脑组织GFAP、LN、NeuN、AQP4水平检测结果表明，对比假手术组，模型组GFAP、LN、NeuN、AQP4表达水平明显降低，差异具有统计学意义（p＜0.05）;对比模型组，三用药组GFAP、LN、NeuN、AQP4的表达水平显著提高，有统计学差异(p＜0.05)。
结论：三种RAS拮抗剂均能降低急性脑缺血再灌注时脑梗死体积。依那普利和坎地沙坦能分别上调急性脑缺血后24h、72h的GFAP、LN、NeuN、AQP4的表达水平，下调了VEGF、HIF-1α、TNF-α及ICAM-1的表达水平。阿利吉仑分别上调急性脑缺血后24h、72h的LN、NeuN、AQP4的表达水平，下调了HIF-1α、TNF-α及ICAM-1的表达水平。阿利吉仑能上调急性脑缺血24h的GFAP水平，但对急性脑缺血72h的GFAP水平调节不明显，并且对急性脑缺血后24h、72h的VEGF水平调节也不明显。由此可以推测，RAS拮抗剂可通过上调GFAP、LN、NeuN、AQP4的表达水平，下调VEGF、HIF-1α、TNF-α及ICAM-1的表达水平，保护神经血管单元。但是肾素抑制剂对急性脑缺血再灌注的保护随着时间的延长，效果下降。RAS拮抗剂也能上调慢性脑缺血的GFAP、LN、NeuN、AQP4水平，表现出对慢性脑缺血神经血管单元的积极疗效。急慢性脑缺血后发生一系列损伤，RAS拮抗剂能降低神经元的凋亡，改善缺氧环境，保护星形胶质细胞，促进神经元的营养，减少脑血管的损伤，保护神经血管单元。