基于压电生物传感的肿瘤细胞检测及纳米颗粒细胞毒性研究

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石英晶体微天平传感技术具有灵敏、简便、经济等优点,被广泛应用在分析化学和生命科学等领域。癌症对人类的生命健康有着严重威胁,为了实现肿瘤疾病的有效防御和治疗、提高患者的生存几率,发展灵敏而准确的肿瘤细胞检测技术是十分关键的步骤。当今社会,随着科学技术的不断发展,人们在享受其带来的便利的同时,也受到了其潜在的威胁。如金属氧化物纳米颗粒的广泛使用,使得人们与之接触的机会逐渐增多,因此对其安全性进行评估十分必要。据此,本学位论文在简要综述细胞传感分析以及压电传感技术的基础上,利用石英晶体微天平检测了急性白血病细胞,并实时评估了氧化锌纳米颗粒的细胞毒性效应。具体内容如下:1.构建了一种基于银增强金纳米颗粒标记方法的压电传感器,用于灵敏及特异性地检测CCRF CEM急性白血病细胞。首先将巯基修饰的CCRF CEM细胞特异性核酸适配体sgc8c修饰到QCM金电极表面,用来特异性捕捉目标细胞。然后,用合成的氨基苯硼酸修饰的金纳米粒子(APBA–AuNPs)对传感器表面的细胞进行标记,随后对银染液中银离子进行还原,用QCM检测沉积到电极表面的银单质。QCM的频率响应信号间接反映了传感器表面捕获的细胞的量,检测线性范围为2×1031×105cells/mL,检出限为1160个细胞。此方法具有灵敏、简便、快速和经济的优势,可望用于其他肿瘤细胞的检测。2.设计了一简单、经济的压电传感技术用于评价氧化锌纳米颗粒对肝癌细胞SMMC7721的毒性效应。首先对纳米氧化锌进行了详细表征,获得了其相关物理特性;然后利用QCM实时监测了不同浓度的纳米氧化锌对肝癌细胞的毒性。此外,结合了其他技术手段进行评估以获得更为可靠的信息:使用光学显微镜对细胞的形态学变化进行观察;采用MTT比色法以及荧光染色法评估了细胞活性;通过流式细胞术验证了细胞对纳米颗粒的吞噬效应。多种方法的研究结果具有较好的一致性,表明氧化锌纳米颗粒对于肝癌细胞具有浓度、时间依赖的毒性效应。此工作对于纳米氧化锌安全性的评估具有一定的参考意义。
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