重组人白介素-2纯化工艺的改进及放大研究

来源 :北京化工大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:cboy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
白介素-2作为一种免疫调节的细胞因子。能够促进B细胞的增殖和分化;促使T细胞得快速增殖;可以对NK细胞进行诱导实现其分化以及增殖。目前市售的白介素-2主要以基因工程表达的重组人白介素-2为主;生产工艺主要以基因工程菌为基础,利用生物发酵法配合大规模的分离纯化技术,得到高纯度的重组人白介素-2,制成重组人白介素-2成品。由于目前重组人白介素-2生产工艺及设备产能较小,不能满足市场的需求。为了紧跟市场发展,适应市场需求,对重组人白介素-2的生产情况进行研究,进行产能升级。主要通过对菌体破碎环节进行设备更新,实现菌体破碎的产生升级;并对下游纯化规模进行放大,实现生产工艺的产能提升。本文的具体研究如下:1.细胞破碎工艺改进及放大针对现有破碎工艺处理能力不足的问题,采用高压匀浆破碎仪代替原有工艺,对该工艺中的参数进行了研究,确定了最优的工艺条件为:匀浆压力55MPa,匀浆破碎两遍,初始温度不高于14℃,对整个匀浆过程冷却处理;实验结果显示,菌体破碎率、产品电泳纯度和单位时间的处理量均达到最优;与现有工艺相比,重组人白介素-2的电泳纯度提高了 9.2%,温度升率降低了 63.7%,单位时间的处理量提高了 27倍。2.凝胶层析工艺放大研究了层析柱规格对重组人白介素-2纯化效率的影响,确定了层析柱规格为φ20cm×80cm的层析柱,线性流速为0.19cm/min情况下,目标蛋白质的收率、电泳纯度较原工艺保持一致,单位时间的处理量较原有纯化工艺有了提高;与现有工艺相比,单位时间的处理量提高了4倍。3.复性过程放大研究了直接稀释复性中,不同复性规模和复性时间对重组人白介素-2复性效果的影响情况。确定了复性体积10L,复性时间5小时为最佳条件,复性后的生物学活性增和单位时间的处理量均有明显提高;与现有工艺相比,电泳纯度保持稳定,生物学活性与比活性均上升了 16.8%,单位时间的处理量提高了 3.7倍。
其他文献
2015年下半年中国股市遭遇了连续暴跌,为应对此次"股灾",我国政府采取了"一揽子"救市措施。当股市发生"股灾"时,政府救市是必要之举,但同时存在一定的救市风险,因为我国尚无
现如今,在智能电网逐步发展的形势下,国家对于电能的生产与输配的经济性以及安全可靠性也均提出了更为严格的要求。配电网是在整个输电系统的终端,其下接诸多电力用户,同时也
<正>近日,商务部联合工业和信息化部、公安部、农业部、国家质检总局、国家安全监督管理总局、国家食品药品监督管理总局印发《关于推进重要产品信息化追溯体系建设的指导意
美国公共广播公司(简称PBS)2008年9月15日播出《我们位居何处:二十一世纪的美国学校》特别电视节目,探讨了美国教育改革发展的困境与思路,具体内容涉及"应对全球化挑战"、"加
对洛阳市红薯生产现状进行了分析,针对生产中存在的品种退化严重、自然灾害频发、配套种植技术相对落后及机械化水平不高等问题,提出了相应对策措施,以期推动洛阳市红薯生产
第一章 预测卵巢癌化疗临床结果的耐药相关SNP研究进展耐药的产生是卵巢癌预后较差的主要因素,其本质原因是基因功能的改变。有研究证实耐药相关基因的单核苷酸多态性(SNPs)
本文通过对我校教学班级实验组的太极拳教学,和对照组进行教学前后以及相互间比较对照,并在一年后继续跟踪调查,就大学生学习太极拳并继续练习后,对呼吸系统和心血管系统等身
针对目前在组织工程中应用的材料不能完全满足组织工程要求,而新型的生物材料具有更为优异的性能和更广阔应用前景的现状,对各种生物材料的性能及应用前景进行综合分析,探讨
自1998~2000年5月,作者用自拟中药方骨协Ⅱ号治疗腰椎间盘突出症150例,取得了满意的疗效.现报告如下.
  纳米模拟酶(nanozymes,简称纳米酶)是指具有类酶催化活性的功能纳米材料。与天然酶及其它人工模拟酶相比较,纳米酶具有诸多独特优点,如稳定性高、大表面积利于修饰生物分