蝴蝶兰无毒苗组培快繁技术研究

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蝴蝶兰(Phalaenopsis spp.)又称蝶兰,观赏价值极高。常用的繁殖方式是组织培养。建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus, CyMV)和齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus, ORSV)是危害兰花植物最严重的两种病毒。研究蝴蝶兰脱病毒方法和途径具有重要意义。本实验以“豹斑花”(Dtps. Leopard Prince)为实验材料,首先以花梗腋芽为外植体建立其组培快繁体系,然后以化学药剂处理作为脱毒方法,感染CyMV和ORSV的蝴蝶兰增殖芽为试材,通过添加不同病毒抑制剂来筛选最佳的病毒抑制剂及浓度。旨在解决蝴蝶兰无毒苗生产快繁的技术问题,为其提供理论依据。主要结果如下:(1)在花宝1号3.0g/L+3.0mg/L BA+0.3mg/L NAA+20g/L蔗糖的培养基中,腋芽萌发效果很好;先期暗培养7d有助于减轻褐化。(2)采用L16(44)正交设计探讨了基本培养基、BA、NAA、蔗糖4种因子对蝴蝶兰不定芽增殖的影响,得出BA是影响增殖系数的主要因子,NAA、基本培养基次之,蔗糖最弱。MS添加8.0mg/L BA+0.8mg/L NAA+20g/L蔗糖对不定芽增殖有良好的效果,增殖系数能够达到2.83。适宜蝴蝶兰丛生芽增殖的有机添加物是香蕉。双芽接法结合切全叶的分切方式有利于丛生芽增殖。(3)诱导蝴蝶兰生根的最佳培养基为3.5g/L花宝1号+0.3mg/L NAA+0.5mg/L IAA+0.5mg/L MET+20g/L蔗糖;生根阶段,活性炭添加量不宜超过1g/L,也可不添加;蔗糖能显著影响试管苗生长情况,添加量以20g/L为佳。移栽基质以水苔最好,成活率达93.18%。(4)氨基寡糖素具有很高的病毒脱除率,达83.33%(CyMV)和66.67%(ORSV),病毒唑次之为83.33%(CyMV)和50%(ORSV),中药类无显著脱毒效果。
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