骨水泥单体对心肌细胞凋亡的诱导及其对Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

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目的通过体外细胞实验,检测Sprague-Dawley乳大鼠心肌细胞与不同浓度骨水泥单体(methyl methacrylate,MMA)共同孵育后存活率及凋亡率的变化,并观察凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达,探讨骨水泥单体对心肌细胞凋亡的作用及其发生机制。方法取新生1-3d Sprague-Dawley大鼠的心肌细胞,体外培养3-5d。实验共分6组。组1为空白对照组,组2为0.5mg/ml MMA组,组3为1.0mg/ml MMA组,组4为2.0mg/ml MMA组,组5为mg/ml MMA组,组6为8.0mg/mlMMA组。MMA与心肌细胞共同孵育2h。CCK-8法检测细胞存活率,根据CCK-8检测结果,选取细胞存活率显著降低的实验组进行TUNEL染色,检测细胞凋亡指数,并利用Western blotting免疫印迹检测Bcl-2、Bax的蛋白表达情况。结果MMA作用心肌细胞2h后,细胞存活率随MMA浓度的增高而逐渐降低,组4-6与对照组相比,细胞存活率均明显降低,分别为(71.0±6.6)%、(55.3±6.0)%、(34.0±7.0)%(P<0.01)。组4-6凋亡指数与对照组相比显著增高,分别为(15.33±0.43)%、(32.88±0.30)%、(65.00±0.59)%(P<0.01)。与对照组相比,组5抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达增高(P<0.01)。结论骨水泥单体可诱导心肌细胞凋亡,其机制可能与抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达和促进促凋亡蛋白Bax的表达有关。
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