背景:重症急性胰腺炎起病急,病情进展迅速,病死率高。近年来,许多实验研究证据表明,NF-κB的激活在急性胰腺炎早期炎症的发生和进展中具有重要作用。在SAP发生时,巨噬细胞中NF-κB活化诱导TNF-α,IL-6,IL-1β和IL-8等大量炎性因子生成,进而加重SAP的炎症反应。被冠以“基因调控剂”的长链非编码RNA近年来被发现在生物生理病理过程中起重要作用,其中就包括炎症。linc RNA-EPS被发现可通过NF-κB调控小鼠巨噬细胞中的免疫应答基因,在体内抑制炎症反应。SAP作为炎症反应中的一种急危重症,目前缺乏特异性治疗,因而linc RNA-EPS在SAP中作用及机制值得探讨。而动物实验表明清胰颗粒能抑制巨噬细胞活化,抑制炎症反应,减轻SAP病情。清胰颗粒治疗SAP的分子机制是否与linc RNA-EPS以及NF-κB有关也有待进一步研究。目的:本实验采用雨蛙素和脂多糖联合腹腔注射制备小鼠SAP模型,观察linc RNA-EPS在SAP模型小鼠腹腔巨噬细胞中的表达变化,同时给予清胰颗粒药物干预探索其治疗作用是否与linc RNA-EPS有关,以及清胰颗粒调节linc RNA-EPS缓解小鼠SAP的作用是否与TLR4/NF-κB通路有关。方法:1.建立成熟的小鼠腹腔巨噬细胞（peritoneal macrophages,p MΦ）提取方法,CD68细胞免疫荧光鉴定提取的p MΦ。2.将18只昆明小鼠随机分为对照组（Control）、重症急性胰腺炎模型组（SAP）和清胰颗粒治疗组（SAP+QYKL）,对各组小鼠胰腺组织进行苏木精-伊红染色（HE）分析。3.使用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组小鼠血清和腹腔灌洗液淀粉酶、脂肪酶、TNF-α和IL-6水平。4.利用RT-q PCR方法检测各组小鼠原代腹腔巨噬细胞中linc RNA-EPS、TNF-αm RNA与IL-6 m RNA水平。5.分离纯化经3%的硫乙醇酸盐流体对照培养基刺激产生的正常腹腔巨噬细胞,制备与清胰颗粒相同原料的清胰颗粒冻干粉,MTT法筛选出清胰颗粒冻干粉作用于小鼠腹腔巨噬细胞的安全作用浓度。6.将正常腹腔巨噬细胞随机分为三组:对照组,LPS组（1,000 ng/ml刺激）和LPS+QYKL组（100ug/ml QYKL+1,000 ng/ml LPS）,Western blot法检测各组细胞TLR4、My D88和NF-κB p65的表达水平。结果:1.原代小鼠腹腔细胞免疫荧光结果显示几乎所有细胞都有CD68表达。2.与Control组相比,SAP组胰腺组织水肿、炎症、坏死、空泡化病理评分均显著增高（P<0.001）,SAP+QYKL组相较于SAP组各项指标均有不同程度缓解（P<0.05）。3.与Control组相比,SAP组小鼠血清和腹腔灌洗液中淀粉酶、脂肪酶、TNF-α和IL-6水平均显著增高（P<0.01）,相较于SAP组,SAP+QYKL组该各项指标均有明显下降（P<0.05）。4.SAP组linc RNA-EPS的表达与Control组相比显著降低（P<0.001）,SAP+QYKL组相较SAP组linc RNA-EPS的表达水平有所增加（P<0.05）;与Control组相比,SAP组TNF-αm RNA、IL-6 m RNA表达均增高,且都具有显著性差异（P<0.001）,SAP+QYKL组较SAP组相比表达量均有所降低（P<0.01）。5.与阴性对照组相比,在QYKL冻干粉作用浓度为1、10、100、500 ug/ml时,细胞活力大于80%,与阴性对照组间的P值均>0.05;QYKL冻干粉细胞作用浓度为1,000、10,000 ug/ml时细胞活力大幅下降,与阴性对照组相比具有统计学意义（P<0.01和P<0.001）。且QYKL冻干粉作用浓度为100 ug/ml时,细胞活力大于90%。6.LPS刺激腹腔巨噬细胞后,细胞内TLR4、My D88和NF-κB p65的表达水平与Control组相比均显著升高（P<0.01）,而100 ug/ml的QYKL冻干粉能抑制LPS刺激的TLR4、My D88和NF-κB p65的升高（P<0.05）。结论:1.清胰颗粒能减轻雨蛙素和脂多糖诱导的小鼠重症急性胰腺炎。2.小鼠重症急性胰腺炎的恶化与腹腔巨噬细胞中linc RNA-EPS表达减少有关,清胰颗粒可以增加SAP模型小鼠腹腔巨噬细胞linc RNA-EPS表达。3.清胰颗粒上调linc RNA-EPS缓解小鼠SAP可能通过对TLR4/NF-κB通路的抑制实现。