背景结直肠癌是人类消化道最常见的恶性肿瘤之一,它的发病率居于世界第3位,仅次于肺癌和胃癌。目前在全球范围内,结直肠癌每年新增人数约100万,死亡人数约50万,约占所有癌症新发病例的10%-15%。其早期症状不典型,约50%的患者在就诊时已经是晚期或已发生了转移。由于环境污染、遗传表达以及不良的生活习惯等多种因素的影响,结直肠癌的发病率越来越高。现在人们认为结直肠癌的发生是由多基因、多步骤参与的复杂过程,涉及到某些癌基因的激活和抑癌基因的失活。在正常情况下,结直肠粘膜上皮细胞的增殖和凋亡之间保持着动态平衡,一旦打破该平衡,就会发生一系列的病理改变。目前结直肠癌的诊断主要依靠内镜、病理、钡剂灌肠检查、超声、CT、血清肿瘤标志物等方法。随着分子生物学的发展,人们对结直肠癌发病的机理有了更深入的了解,很多研究者检测到结直肠癌组织中某些抑癌基因表达水平发生了变化,提示其与结直肠癌的发生存在一定关系。溶质载体家族5成员8(solute carrier family 5member 8,SLC5A8)是近年发现的一个新的候选抑癌基因,P53基因是目前研究的比较深入和广泛的抑癌基因,它们与结直肠癌的发生、发展都存在一定关系。SLC5A8基因是2002年Rodriguez等发现,并且从人肾c DNA文库中克隆鉴定的编码610个氨基酸蛋白的序列,认为是SLC5家族的第8个成员,被命名为SLC5A8。SLC5A8基因位于人类染色体的12q13-23,编码蛋白属于钠离子/葡萄糖共转运蛋白家族成员,是钠离子耦联的转运短链脂肪酸、乳酸、烟酸和碘化物的载体。SLC5A8编码蛋白在肠道中分布于末端回肠和整段大肠的刷状缘膜,并在末端结肠和直肠高表达。SLC5A8基因在人类的许多肿瘤中如甲状腺癌、食管癌、胃癌、肺癌、脑胶质瘤等中表达降低或缺失,目前,国内外学者研究认为SLC5A8基因表达下降的机制主要是SLC5A8基因外显子1的GPG岛的甲基化及组蛋白去乙酰化。SLC5A8表达的转运体的所有底物中,丁酸、丙酸和丙酮酸的功能是作为组蛋白脱乙酰基酶抑制剂,它们可以介导多种肿瘤细胞的凋亡,可能是其抑制肿瘤的机制。尤其是丁酸,它是细菌的发酵产物,它可以促进正常结肠上皮细胞的变异,通过上调促凋亡基因和下调抗增殖基因而导致细胞凋亡。所以SLC5A8基因的失活可能成为结直肠癌发生的原因之一。p53基因在1979年由Lane等首次报道,是目前研究的比较深入的基因之一,它位于人类17号染色体的短臂,包含有11个外显子和10个内含子,编码一个包含393个氨基酸的蛋白质。对它的认识人们经历了肿瘤抗原、癌基因、抑癌基因三个阶段。p53基因有野生型和突变型两种,野生型p53是抑癌基因,它参与细胞周期的调控,对抑制肿瘤的增殖有重要作用,当野生型p53转变为突变型p53后,则失去了对细胞生长的抑制作用,进而导致了肿瘤的发生。目前研究发现p53基因与大约50%的肿瘤有密切关系,几乎所有的肿瘤都有p53基因的突变。目的 探讨SLC5A8基因和p53基因在结直肠癌组织中的表达。方法 采用(1)实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测SLC5A8基因m RNA和p53基因m RNA在30例结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织中的水平;(2)HE染色检测收集的结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织的腺管及细胞的形态;(3)免疫组化检测SLC5A8基因蛋白和p53基因蛋白在结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织的表达情况。应用SPSS16.0统计软件进行分析,符合正态分布的计量资料以均数±标准差(x±s)表示,不符合正态分布的以平均秩次表示,SLC5A8基因m RNA水平两组间和p53基因m RNA水平两组间的比较符合正态分布的采用t检验,不符合正态分布的两组间比较采用Mann-Whitney u秩和检验,多组间采用K-ruskal-walls H秩和检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 实时荧光定量PCR检测到(1)30例结直肠癌患者中22例患者癌组织中SLC5A8基因m RNA水平低于癌旁组织;3例患者癌组织和癌旁组织重SLC5A8基因均不表达;5例患者癌组织中SLC5A8基因m RNA水平高于癌旁组织。SLC5A8基因m RNA水平在癌组织和癌旁组织的差异与患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤分期、淋巴结转移均没有统计学意义(p>0.05)。(2)30例结直肠癌患者中13例患者癌组织中p53基因m RNA水平低于癌旁组织;17例患者癌组织中p53基因m RNA水平高于癌旁组织,p53基因m RNA水平在癌组织和癌旁组织的差异与患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤分期没有明显统计学意义(p>0.05),与淋巴结转移有统计学意义(p<0.05)。免疫组化技术检测到(1)SLC5A8基因蛋白表达主要位于结直肠组织细胞的胞质,癌旁组织细胞的胞质有少量表达,而癌组织细胞的胞质未见明确表达。(2)p53基因蛋白表达主要位于结直肠组织细胞的胞核,在癌组织细胞的胞核有一定的表达,而癌旁组织细胞的胞核几乎未见表达。结论 (1)SLC5A8基因在结直肠癌组织中表达明显下降,提示其表达水平与结直肠癌的发生可能存在一定关系;(2)p53基因在结直肠癌组织中表达升高,提示其表达水平与结直肠癌的发生有关,主要机制可能是p53基因突变。