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研究背景脓毒症(sepsis)是病原微生物入侵机体后引起的全身炎症反应综合征(SIRS),其后续症包括重症脓毒症(severe sepsis)、脓毒症休克(septic shock)、多器官功能不全(MODS)。脓毒症在住院病人和ICU病房有着较高的发病率和病死率,已成为严重威胁人类健康的疾病之一。流行病学调查显示2000年美国脓毒症的发病率为240.4/10万,虽然住院病人中重症脓毒症的死亡率有所下降,但每年因此疾病而死亡的实际人数却在增加。美国每年投入高达170亿美元医疗费用用于脓毒症的诊治。脓毒症是环境和遗传因素共同作用的多因素疾病,机体促炎和抗炎反应紊乱、免疫功能失调、凝血/纤溶系统功能失衡等是其复杂的病理生理机制。脓毒症的易感性、严重程度及其预后在个体间的显著差异提示遗传因素可能在脓毒症的发生发展中起重要作用。防御素是固有免疫系统的重要组成部分,参与构筑机体抵抗外来病原微生物的第一道防线。β防御素1是最早发现的一种β防御素,它具有较强的广谱抗菌活性,能够杀死G~+和G~-菌、真菌、包膜病毒等多种病原微生物,并且可以趋化未成熟树突状细胞(DC)和记忆性T细胞到局部炎症反应部位发挥效应,在固有免疫和获得性免疫中发挥重要作用。体外实验已证实,β防御素1可以被LPS、IL-1β、INF-γ、精氨酸诱导增高表达;在体研究发现,脓毒症和感染性疾病病人体内β防御素1水平升高,并且静脉注射LPS后的志愿者之间以及感染病人的β防御素1诱导表达水平存在差异。编码β防御素1的基因(DEFB1)位于染色体8p23.1-p23.2。以往研究己发现β防御素1基因(DEFB1)的单核苷酸多态性(SNPs)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘和遗传性过敏症、HIV感染及口腔黏膜假丝单胞菌感染等疾病存在相关性。Sun CQ等研究发现β防御素1(DEFB1)基因启动子区域-688G/C单核苷酸多态性与β防御素1蛋白表达水平相关,DEFB1基因启动子区域-688G/C单核苷酸多态性的基因型频率和等位基因频率在前列腺癌患者与健康对照者之间均无显著性差异,但等位基因C出现的频率在前列腺癌患者中相对较高。至今,对于DEFB1基因启动子区域-688G/C单核苷酸多态性与重症脓毒症易感性和预后的相关性未有报道。研究目的本文旨在通过病例-对照研究分析DEFB1基因启动子区域-688G/C单核苷酸多态位点的基因型,探讨DEFB1基因启动子区域-688G/C单核苷酸多态性与重症脓毒症易感性和预后的相关性。实验方法本研究经医院伦理委员会批准,患者知情同意并由本人或直系亲属签字后进行。重症脓毒症组共纳入患者211例,均符合1992年和2001年美国胸科医师协会及危重病学会制定的脓毒症诊断标准,并除外孕妇及年龄小于18岁的患者。采用急性生理学及慢性健康评分(APACHEⅡ)和脓毒症相关器官衰竭评分(Sepsis-related OrganFailure Assessment Score)(SOFA)评价患者的疾病严重程度。对照组157例,为同期择期手术后未并发脓毒症的病人。以2%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)抗凝管抽取受试者外周静脉血10ml,QIAamp DNABlood Mini Kit全血DNA提取试剂盒提取基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因片段,特异性的限制性内切酶Cac8I酶切PCR产物分析基因型。实验数据由SPSS13.0统计学软件进行分析,计量资料用均数±标准差(mean±SD)表示,计数资料用百分比表示,x~2检验及Fisher’s exact检验比较组间基因型和等位基因频率差异,P＜0.05为有统计学差异。实验结果DEFB1基因启动子区域-688位点基因型GG、GC、CC分布频率在重症脓毒症组分别为71.1%、27.5%、1.4%,对照组分别为70.1%、28.6%、1.3%,统计学上无显著性差异(P=0.96);等位基因G、C的频率在重症脓毒症组中分别为84.8%、15.2%,对照组中分别为84.4%、15.6%,统计学上无显著性差异(P=0.87)。基因型GG、GC、CC分布频率在重症脓毒症中死亡组分别为67.3%、31.8%、0.9%,存活组分别为75.2%、22.8%、2.0%,统计学上无显著性差异(P=0.29);等位基因G、C的频率在重症脓毒症中死亡组分别为83.2%、16.8%,存活组分别为86.6%、13.4%,统计学上无显著性差异(P=0.32)。结论DEFB1基因-688位点基因型分布和等位基因频率在重症脓毒症组和对照组以及重症脓毒症中死亡组和存活组之间均无显著性差异,与重症脓毒症的易感和预后均无相关性。β防御素1基因(DEFB1)启动子区域-688G/C单核苷多态性不能作为重症脓毒症易感和预后评价的指标。