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目的:研究黄连素对人胃癌MGC-803细胞增殖和侵袭转移的影响。
方法:实验分为胃癌细胞组(只加入MGC-803细胞)和黄连素处理组(加入相应浓度的黄连素)。采用MTT比色法检测不同终浓度的黄连素对MGC-803细胞增殖的影响。采用免疫组化方法和免疫印迹法检测黄连素对人胃癌MGC-803细胞中ICAM-1、MMP-2、CD147、iNOS、Survivin及TIMP-2蛋白阳性表达率的影响。应用荧光实时定量逆转录多聚酶链反应(Real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,Real-timeRT-PCR的方法检测黄连素对ICAM-1、MMP-2、CD147、iNOS、Survivin及TIMP-2 mRNA表达水平的影响。
结果:在0~40gmol/L范围内,黄连素可显著抑制MGC-803细胞增殖(P<0,01),且呈剂量时间依赖性。免疫组化和免疫印迹法检测表明用黄连素处理胃癌细胞18h后,ICAM-1、MMP-2、CD147、iNOS、Survivin蛋白的表达率均较胃癌细胞组显著下降,而TIMP-2蛋白的表达率较胃癌细胞组明显上升(P<0.01)。Real-time RT-PCR法对人胃癌MGC-803细胞中ICAM-1、MMP-2、CD147、iNOS、Survivin及TIMP-2 mRNA含量的检测结果显示,黄连素处理胃癌细胞18 h后ICAM-1、MMP-2、CD147、iNOS、Survivin mRNA表达水平均有明显下调,而TIMP-2 mRNA表达水平明显上调,且与胃癌细胞组相比均有显著的统计学意义(P<0.01)。
结论:黄连素具有抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖、细胞侵袭和转移的作用,其作用机制可能是通过调节ICAM-1、MMP-2、CD147、iNOS、Survivin及TIMP-2蛋白的表达以及调控ICAM-1、MMP-2、CD147、iNOS、Survivin及TIMP-2 mRNA的表达水平而得以实现。