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目的:研究超短波(ultrashortwave,USW)联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后的治疗作用。方法:贴壁培养法原代培养骨髓间充质干细胞至第3代,采用改良Allen’s法构建大鼠脊髓损伤模型,并且随机分为5个实验组:假手术组(sham group)、对照组(control group)、骨髓间充妨干细胞组(BMSCs group)、超短波组(USW group)和联合治疗组(BMSCs+USWgroup)。每个实验组再随机分为4个亚组,其中假手术组每个亚组2只,其余各组每个亚组4只;并在脊髓损伤前、脊髓损伤后以及治疗后的分别进行BBB评分,评分的时间为第Id,7d,14d,28d,以此来评估恢复效果;在治疗后4周内处死大鼠;应用免疫荧光法鉴别第3代BMSCs表面抗原CD45和CD90;分别采用HE染色、免疫组化和Western blot法观察SCI后1d,7d,14d,28d的损伤处脊髓组织内炎性细胞、iNOS、Arg-1的表达量。结果:原代以及第三代培养的BMSCs均取得成功,通过免疫荧光法进行鉴定,结果是细胞表面抗原CD45和CD90呈阳性表达;假手术组的手术前以及手术后BBB评分均没有改变;在SCI后的第1天,BBB评分在4个损伤组均为最低,且4组之间的BBB评分无明显差别(P>0.05),并且各损伤组的运动功能均显示出不同程度的恢复,随着时间的推移进展;从SCI后第1周开始BMSCs组、USW组及BMSCs+USW组分别与对照组对比来看,均出现显著差异(均P<0.001),此后2-4周3组与对照组相比,BBB评分呈增高趋势,均出现显著差异(均P<0.001);而从USW组及BMSCs+USW组两组BBB评分来看,在SCI后的前两周对比来看,无明显差异(P>0.05),但在第4周时USW组及BMSCs+USW组两组之间的比较开始出现差别(P<0.01);然而USW组及BMSCs+USW组与BMSCs组相比,在第1周时就出现差异(P<0.05,P<0.05),随着时间的延长,在第2-4周时开始出现明显差异(均P<0.01);因此在改善大鼠运功功能学上面,主要是以USW的作用为主,而BMSCs起辅助作用;HE染色观察可以发现BMSCs+USW组、USW组及BMSCs组炎性细胞在损伤后1周以后明显少于对照组,同时坏死空洞面积要相对减少;免疫组化结果显示在损伤节段脊髓中iNOS的表达量升高,并在损伤后第2周达到高峰;在SCI后第2周,BMSCs组、USW组、BMSCs+USW组iNOS阳性细胞的表达量均少于对照组,且有显著性意义(均P<0.001),而BMSCs组与USW组相比,iNOS阳性细胞的表达量要少,但无明显差异(P>0.05),BMSCs+USW组iNOS阳性细胞的表达量最少,分别与BMSCs组及USW组相比,存在差异(均P<0.001);第4周时,BMSCs组与USW组两组之间iNOS阳性细胞的表达量仍无明显的差异(P>0.05),但BMSCs+USW组分别与BMSCs组及USW组这两组进行对比,均存在不同差别(P<0.05,P<0.001);Arg-1的表达量升高,并于第1周达到高峰;第1周时BMSCs+USW组、BMSCs组及USW组均较对照组增多,与之对比有显著性意义(P<0.001),BMSCs组与USW组相比Arg-1阳性表达降低,但无明显差异(P>0.05),而BMSCs+USW组相对于BMSCs组及USW组Arg-1阳性表达是增多的,且存在差异(P<0.001,P<0.01);在第4周时BMSCs+USW组、BMSCs组及USW组的Arg-1表达量仍高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001),但各组均较第1周Arg-1表达量有所下,USW组与BMSCs组比较无显著性差异(P>0.05);而Western blot结果显示出BMSCs+USW组,在脊髓损伤后第1周的iNOS表达量要少于其余三组,而脊髓损伤后第2周的Arg-1表达量则相对于其他三个损伤组来说是升高的。结论:超短波(USW)联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠脊髓损伤可起到治疗修复作用。