不同血管活性药物对脓毒症休克兔肠屏障的影响

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tandr001
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目的:本研究通过建立脓毒症休克模型,第一部分评价不同血管活性药物对脓毒症休克兔肠黏膜通透性的影响,第二部分初步探讨其可能的机制。方法:采用盲肠结扎穿孔(Cecal Ligation and Puncture, CLP)联合静脉注入内毒素制备脓毒症休克模型,将63只新西兰大白兔随机分为正常对照组(A组,n=7)、模型对照组(B组,n=14)、多巴胺组(C组,n=14)、去甲肾上腺素+多巴酚丁胺组(D组,n=14)、去甲肾上腺素+精氨酸升压素(arginine vasopressin,AVP)组(E组,n=14)。B、C、D、E组分别于造模后3h、6h 2个时相点处死7只,留取尿标本测定各时相点乳果糖与甘露醇比值( lactulose/mannitol,L/M) ,留取回肠标本作光镜和电镜检查,并采用Tunel法检测肠黏膜细胞凋亡情况,荧光定量PCR(Real-time Polymerase Chain Reaction)技术检测Caspase-3 mRNA的表达。实验过程中连续监测平均动脉压、心率。结果: 1.动物造模后,血压即下降,短暂回升后再次出现下降,2小时内平均动脉压(MAP)下降至基础值的60 %以下,表明模型复制成功;2.尿中L/M值:1)较A组,各组L/M值均有升高,其中B、C组显著增高(P <0.01),D组在6h显著高于A组(P <0.01);2)与B组同时向点比较,D、E组L/M值在3h、6h均降低(P <0.05);3)E组L/M值在6h较D组降低,差异有统计学意义(P <0.05)。3.光镜下:B、C组兔肠黏膜萎缩,上皮细胞变性,甚至坏死、脱落,间质广泛水肿,毛细血管扩张;D、E组较B组各层结构清晰,绒毛排列规则,上皮层基本完整;4.电镜下:B、C组上皮细胞微绒毛排列不整齐、稀疏,上皮细胞间紧密连接增宽,胞内内质网空泡变性,线粒体嵴消失或空泡;D、E组肠黏膜上皮细胞损伤较B组有所改善。5.细胞凋亡观察:1)A组肠黏膜上皮仅见较少量的Tunel阳性细胞;2)较A组,B、C组凋亡细胞数明显增加,凋亡指数显著增高(P <0.01),D、E组在6h明显增高(P <0.01);3)较B组同时向点,D、E组肠黏膜上皮凋亡均显著降低(P <0.01)。6. Real-time PCR结果:1)较A组,B、C组Caspase-3 mRNA表达明显增加(P <0.01),D组在6h Caspase-3 mRNA表达明显增加(P <0.01);2)较B组同时向点,D、E组在3h Caspase-3 mRNA表达降低(P <0.01),C、D、E组在6h Caspase-3 mRNA表达均降低(P <0.01)。结论:脓毒症休克时肠黏膜屏障损伤严重;去甲肾上腺素联用多巴酚丁胺或小剂量精氨酸升压素可以有效缓解脓毒症休克引起的肠形态和肠通透性改变;去甲肾上腺素联用多巴酚丁胺或小剂量精氨酸升压素可能通过降低Caspase-3表达使小肠上皮细胞凋亡减少,从而对肠上皮结构起保护作用。
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