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目的:观察不同浓度的同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)在1、6、24小时对血管内皮细胞(vein endothelia cell,VEC)的基质金属蛋白酶(matrix metallopoeinases,MMPs)基因表达的影响,在基因表达水平探讨同型半胱氨酸损伤血管内皮细胞功能,诱发动脉粥样硬化和斑块破裂的相关机制。 方法:在体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株CRL-1730(human umbilical vein vascular endothelia cell,HUVEC)中加入终浓度为0、10、50、100、1000μmol/L的同型半胱氨酸共同孵育,分别于1,6,24小时收集细胞。使用柱式总RNA提取试剂盒裂解细胞,提取细胞总RNA。采用逆转录—聚合酶链反应半定量检测不同浓度、不同时间点同型半胱氨酸刺激后CRL-1730细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMP-1)mRNA的表达。 结果:(1)无同型半胱氨酸(0μmol/L)和生理浓度同型半胱氨酸(10μmol/L)存在时,人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)株CRL-1730即有MMP-1,MMP-9和TIMP-1mRNA的表达。6小时、24小时与1小时比较,MMP-1mRNA的表达和MMP-1/TIMP-1mRNA的比值显著降低(P<0.01),6小时与24小时表达无差别(P>0.05)。MMP-9 mRNA的表达和MMP-9/TIMP-1 mRNA的比值6小时、24小时与1小时比较显著上调(P<0.01),6小时与24小时表达无差别(P>0.05)。TIMP-1mRNA的表达在1、6、24小时无差别(P>0.05)。 (2)病理浓度同型半胱氨酸(≥50μmol/L)刺激HUVEC CRL-1730细胞后可诱导MMP-1 mRNA表达呈剂量依赖式上调(P<0.01),两者成呈正相关(P<0.05)。中低浓度同型半胱氨酸(50μmol/L、100μmol/L)可上调MMP-9