论文部分内容阅读
研究背景近年来随着我国人口老龄化问题日益突出,如何延缓衰老,增强机体抗病能力,提高老年人的生活质量,延缓人口老龄化进程,已成为当下研究热点之一。衰老,是机体生命过程中随年龄增长而出现的全身多器官、多系统的组织结构改变及功能减退的综合反应,是由多基因调控,并受环境、心理等多因素影响的复杂的遗传现象。尽管衰老是生命的必然走向,然而延缓衰老却是可能的。有关衰老的机制,已有多种学说和观点。其中与衰老相关的免疫系统改变即免疫衰老已受到广泛关注。前期研究表明,红芪与黄芪在改善免疫功能、抗氧化衰老等方面有着相似的功效,且红芪在促淋巴细胞增殖和IL-2分泌等方面作用较黄芪显著;含红芪玉屏风散与原方在增强免疫方面有着相似的作用,均具有一定的延缓免疫衰老作用,且在提高脾脏指数、促进脾T淋巴细胞增殖、降低衰老细胞数等方面含红芪玉屏风散作用更为显著。目的本课题在前期对红芪、黄芪及其复方对免疫功能比较研究的基础上,以等剂量的红芪替代玉屏风散中的黄芪,通过动物实验观察含红芪与含黄芪玉屏风散对SAMP8小鼠脾T细胞活化的影响,进一步阐述含红芪玉屏风散与原方在细胞免疫方面对延缓衰老作用机制的差异,为含红芪复方抗免疫衰老机制提供理论依据。方法昆明种小鼠10只(作为青龄鼠组),SAMP8小鼠40只(随机分成4组:空白模型组、胸腺肽组、玉屏风散红芪组和玉屏风散黄芪组)。其中中药组、胸腺肽组分别按6g·kg-1·d-1、4.6 mg·kg-1·d-1剂量进行灌胃,青龄鼠组、空白模型组均以相同体积的生理盐水灌胃。连续给药14 d后眼球摘除取血,收集血清,并无菌取脾脏,制备小鼠脾淋巴细胞悬液。ELISA检测血清IL-2、IFN-y的含量;流式细胞术检测脾T细胞表面分子CD3、CD4、CD8、CD28及CD152的表达;实时荧光定量PCR技术检测其CD28mRNA、PI3KmRNA、p38MAPKmRNA的表达;Western Blot检测其PI3K、p38MAPK蛋白的表达;免疫组化法检测脾脏p38MAPK蛋白表达。结果与空白模型组比较,各给药组小鼠血清IL-2、IFN-y含量均增高(P＜0.05),且玉屏风散红芪组IL-2含量高于玉屏风散黄芪组(P<0.05),但中药组效果均不及胸腺肽组(P＜0.05);中药组脾T淋巴细胞表面CD8分子表达增高,胸腺肽对于CD8分子表达无影响,各给药组CD4分子、CD28CD152双阳性表达及CD4/CD8 比值均下降(P<0.05);各给药组 CD28 mRNA、PI3K mRNA、p38MAPK mRNA表达量均上调(P＜0.05),且玉屏风散红芪组效果均优于玉屏风散黄芪组(P<0.05),其中除对PI3KmRNA表达玉屏风散红芪组与胸腺肽组效果相当外(P>0.05),余中药组效果均不及胸腺肽组(P＜005);各给药组PI3K、p38MAPK蛋白含量及p38MAPK蛋白阳性率均上调(P<0.05),但中药组效果均不及胸腺肽组(P＜005)。结论含红、黄芪玉屏风散均能改善SAMP8小鼠免疫功能,且含红芪玉屏风散在提高血清IL-2含量和上调脾脏T淋巴细胞CD28 mRNA、PI3K mRNA、p38MAPK mRNA表达方面效果更显著。