刺玫蔷薇茎中黄酮苷元提取、纯化及抗氧化活性的研究

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刺玫蔷薇生长于我国大、小兴安岭和长白山,资源丰富,有较好的开发利用价值,但目前国内关于刺玫蔷薇的研究报道,主要集中在刺玫果的成分及其加工制品,如饮料、茶、糕点和糖果等,而对其茎叶部分的研究和利用较少。而刺玫蔷薇茎中富含的黄酮类化合物具有抗氧化、抗衰老、治疗心脑血管疾病、抗菌消炎等多种生理功能。本文以刺玫蔷薇茎为原料,主要研究了刺玫蔷薇茎中黄酮苷元的提取工艺、分离纯化工艺及体外抗氧化作用。主要试验结果如下:1.刺玫蔷薇茎中化学成分的预实验。采用植物化学成分系统预试法,确定了刺玫蔷薇茎中含有多糖和苷类、酚类、黄酮类、香豆素及内脂类、鞣质、有机酸类、皂苷类;可能含有氨基酸、多肽、蛋白质、蒽醌类化合物;不含有生物碱、强心苷类、甾体和三萜类化合物。专项预试法确定了刺玫蔷薇茎中黄酮类化合物为二氢黄酮(醇)类。2.刺玫蔷薇茎中黄酮苷元提取工艺的研究。首先对黄酮苷元的水解条件进行考察,得出最佳水解条件为:盐酸溶液与原料比为4∶1、盐酸溶液浓度为3mol/L、水解时间为2h、水解温度为90℃。其次选用两种溶剂进行浸提,再水解得到黄酮苷元。经过试验得出:在单因素试验的基础上通过正交试验确定了用乙醇溶液作为提取溶剂时最佳提取条件为:原料粒度为100~120目、乙醇溶液浓度为60%、提取温度为80℃、料液比为1∶15、提取时间为3h。在此条件下黄酮苷元的提取率为93.36%。通过单因素试验确定了以醋酸钠溶液作为提取溶剂时的最佳提取条件为:原料粒度为100~120目、醋酸钠水溶液浓度为6%、提取温度为90℃、料液比为1∶20、浸提时间选择为4b。单因素试验中黄酮苷元的提取率最大为85.49%。通过两种溶液提取条件及结果的比较可以看出:两种溶剂提取条件相似,但提取率差异较大,因此选择乙醇溶液作为提取溶剂。3.刺玫蔷薇茎中黄酮苷元纯化工艺的研究。选择8种大孔吸附树脂,通过静态吸附比较,筛选出较适合纯化刺玫蔷薇茎中黄酮苷元的大孔树脂,研究该树脂对刺玫蔷薇茎中黄酮苷元的静态吸附、解吸特性及确定其动态吸附、解吸工艺。结果表明D4020树脂具有较高的吸附率和解吸率,适于纯化刺玫蔷薇茎中黄酮苷元,其最佳吸附、解吸条件为:原液浓度为0.9mg/mL,pH值为4.5,上样流速为1mL/min,径高比为1∶15;洗脱液为70%的乙醇溶液,pH值为9.0,用50mL的洗脱液基本上能将刺玫蔷薇茎中黄酮苷元洗脱下来。纯化后刺玫蔷薇茎中黄酮苷元的纯度可由纯化前的22.4%上升到57.3%,说明D4020大孔树脂对刺玫蔷薇茎中黄酮苷元起到了较好的分离纯化效果。4.刺玫蔷薇茎中黄酮苷元抗氧化活性的研究。分别对刺玫蔷薇茎中黄酮苷元提取物的总抗氧化能力、清除羟自由基,清除DPPH·自由基和抗脂质过氧化能力进行研究。结果表明,刺玫蔷薇茎中黄酮苷元具有良好的抗氧化活性,且经过树脂纯化后的黄酮苷元抗氧化活性要好于粗黄酮苷元。
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