Sd介导Hippo通路靶基因表达机制的探讨

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Hippo通路最早是在果蝇中发现的,近几年的研究发现,Hippo信号通路通过同时调节细胞的增殖与凋亡来控制器官的大小。Hpo通路是一个激酶级联途径,Ste20样激酶Hpo在含有WW结构域的衔接蛋白Sav的帮助下磷酸化并激活NDR家族激酶蛋白Wts。Wts再借助Mob家族蛋白Mats磷酸化下游的Yki抑制其活性来抑制靶基因的转录,在哺乳动物中该条信号途径的紊乱会导致肿瘤的发生。Scalloped是含有DNA结合结构域的转录调控因子,是TEAD/TEF家族蛋白在果蝇中的唯一成员。diapl上游调控区域含有最短的Hippo通路应答元件,Sd与该元件特异性结合,介导Hippo信号通路靶基因的转录调控。Sd对于Yki诱导的组织过度生长和靶基因表达是必需的,并且Sd的活性与其在哺乳动物中的同源物是保守的。研究表明,Sd作为DNA结合转录因子与Yki相互作用形成转录复合物调节Hpo靶基因的表达。目前的研究普遍认为Sd协同Yki促进Hpopathway靶基因的转录,但并不清楚Sd自身对靶基因的转录是否也起促进作用,此外,Sd介导Hippo通路靶基因表达的具体机制也不甚了解,本课题主要对此进行研究。初期工作的结果表明Sd自身是起抑制作用的,考虑到Sd协同Yki起促进作用,猜测Sd可能是通过自身形成二聚体起抑制作用,也可是能通过与其他蛋白结合起抑制作用,对此进一步进行研究。通过Co-IP,Western Blot等一系列实验得出Sd自身并不形成二聚体,在其他因子如最短的Sd结合序列HRE存在的条件下也不形成二聚体。又采用酵母双杂交和串联亲和纯化的方法寻找与Sd结合的蛋白,筛选到了几个感兴趣的基因。  
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