【摘 要】
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去氨加压素是人工合成的精加压素类似物,由于其可能存在的稀释血液的功能,对运动员服用的兴奋剂具有掩蔽效果,因此被世界反兴奋剂机构于2011年列入禁用清单中的掩蔽剂类禁用
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去氨加压素是人工合成的精加压素类似物,由于其可能存在的稀释血液的功能,对运动员服用的兴奋剂具有掩蔽效果,因此被世界反兴奋剂机构于2011年列入禁用清单中的掩蔽剂类禁用物质中。去氨加压素具有小肽类物质的结构,如何从人的体液样本中高效的提取及准确的检测出小肽类物质,是兴奋剂检测领域的难题之一,因此,开展对于去氨加压素检测的相关研究极其重要且势在必行。本研究首先对已有报道的固相萃取技术进行前处理改进实验,缩减时间并提高效率;利用液相色谱-串联质谱联用技术分别在液相色谱条件、质谱条件等方面进行实验和研究,最终建立从尿液样品和血浆样品中检出去氨加压素的LC-MS/MS检测方法;然后对建立的检测方法进行方法学验证。使用检测方法从志愿者受试后留取尿液样品及血浆样品中检测去氨加压素原型,绘制代谢曲线,了解去氨加压素的代谢规律并确定该检测方法的检测窗口期。之后对受试后收集到的阳性尿液样品进行人体内源性参数的检测和记录,使用ABPS离线软件对数据进行可疑度判定,总结数据的异常波动。最后将受试后采集的血液样本和受试前的空白血液样本一同测试常规血液参数,将参数逐项对比,使用ABPS离线软件对数据可疑度进行判定,寻找异常变化。在完成上述研究的基础上建立了前处理高效、检测专属性强且方法学实验结果优良的去氨加压素检测方法。同时,使用此检测方法对八名受试者留取的阳性尿样进行检测,其结果均检测出去氨加压素原型,从绘制的代谢曲线图看,最长检测窗口期可以达到服药后13小时;研究对受试后尿样进行了内源性参数的检测和统计,结果证明服用去氨加压素对人体内源性参数有一定影响。研究还对药物受试后的血液样品与空白样品相比,在九项常规血液参数中均未发现明显的异常变化,同时ABPS软件系统判定也未见明显异常。运用本研究建立的方法成功从所有志愿受试者留取的尿液样品中检测到去氨加压素原型,首次使用LC-MS/MS的检测结果绘制了代谢曲线,了解了该药物在人体内代谢情况并最终确定了该方法的检测窗口期。本研究弥补了实验室对该药物兴奋剂检测能力的空白,为兴奋剂检查提供了一定的数据依据。人体内源性参数初步实验结果表明.服用去氨加压素会导致内源性参数数据一定和度的异常波动;由该药物药理诱导的血液稀释程度未对血液参数造成明显的异常波动
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