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干旱严重影响植物生长发育和经济产量,甚至导致植物死亡。因此,研究植物耐旱性的遗传基础和分子机理,探索培育抗旱性植物的有效途径,是人们关注的一个重要科学问题。本文在研究拟南芥ANAC055系统发育和干旱胁迫对ANAC055基因表达影响的基础上,采用CRISPR/Cas9技术构建ANAC055基因的功能缺失突变体,系统分析ANAC055功能缺失突变体的干旱性表型,以明确ANAC055在拟南芥响应干旱胁迫的重要作用;进而采用酵母双杂、BiFC等技术研究ANAC055的下游靶基因和互作蛋白,以揭示ANAC055调控干旱胁迫响应的分子机理。主要结果如下:1、拟南芥ANAC055基因属于NAC转录因子家族,位于拟南芥第3号染色体上。该基因编码的蛋白包含1个NAM保守结构域,被定位在细胞核中。2、拟南芥ANAC055基因明显受到干旱胁迫的诱导表达。在干旱胁迫后3 h和6h均被诱导表达。3、利用CRISPR/Cas9技术获得了ANAC055基因的功能缺失纯合突变体2种。在干旱胁迫下,这2种ANAC055基因功能缺失纯合突变体幼苗地上鲜重与野生型相比没有显著性差异,但主根长度均明显短于野生型;同时突变体叶片的失水率也都明显高于野生型。表明ANAC055缺失突变体对干旱胁迫更为敏感。4、酵母双杂和BiFC实验发现,ZF2、AT2G31945、MYB2和ERD1等4种蛋白与ANAC055蛋白相互作用,亚细胞定位表明它们都主要分布在细胞核中。5、成功构建了 ZF2、AT2G31945、MYB2和ERD1等4种蛋白基因敲除载体,并初步获得了 ZF2基因的功能缺失纯合突变体和MYB2基因的杂合突变体。但这4种互作蛋白基因功能缺失纯合突变体的创建及其抗旱表型鉴定,还有待进一步开展和完成。本文结果初步表明,拟南芥ANAC055在响应干旱胁迫中具有重要作用。它是否与ZF2、AT2G31945、MYB2和ERD1等蛋白相互作用共同调控干旱胁迫应答,有待进一步研究。