论文部分内容阅读
目的:应用MTT、体外细胞克隆形成实验,研究丹参素钠对Lewis肺癌细胞的细胞毒性和体外放射增敏作用。方法:将对数生长期的Lewis肺癌细胞按6×103个/孔细胞密度接种到96孔板,按120ug/ml、60ug/ml、40ug/ml、30ug/ml、20ug/ml、10ug/ml浓度梯度给予丹参素钠,采用MTT比色法研究丹参素钠对Lewis肺癌细胞的细胞毒性,计算出Lewis肺癌细胞被抑制一半的丹参素钠浓度(IC50值)、Lewis肺癌细胞被抑制10%的丹参素钠浓度(IC10值)。将IC10值作为放射增敏的工作浓度。同时采用MTT方法计算出顺铂对Lewis肺癌细胞的的IC50、IC10值。采用细胞克隆形成法研究丹参素钠对离体Lewis肺癌细胞的体外放射增敏作用。实验分为空白组、单纯照射组、药物+照射组、阳性对照组,阳性对照组采用顺铂进行对照。在照射前一天在培养瓶中分别加入IC10值浓度的丹参素钠和顺铂,其中分别给予OGy、0.5Gy、1Gy、2Gy、3Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy照射剂量梯度。培养瓶中的细胞接受照射后放入在37。C、0.5%C02恒温孵箱中4小时弃去原培养基,消化、计数,根据培养瓶内所受不同剂量的照射确定向培养皿种植的细胞数,每组设3个培养皿,将培养皿在37。C、0.5%C02恒温孵箱中培养14天。应用计数克隆形成方法,计数细胞存活分数、克隆形成率,采用单击多靶数学模型进行曲线拟合作图,计算出放射增敏相关参数N、DO、Dq、SERDO、SERDq、SERsF2,比较各组之间的放射增敏作用的强弱。结果:丹参素钠对Lewis肺癌细胞的IC50值77.75ug/m1(取78ug/m1),IC10值为14.39ug/m1(取14ug/m1);顺铂对Lewis肺癌细胞的IC50值51.35ug/ml(取51ug/m1),IC10值为11.18ug/m1(取11ug/m1)。空白组Lewis肺癌细胞的克隆形成率为66%。单纯照射组的N值为1.975,D0值为1.5475Gy, Dq值为1.5354Gy;丹参素钠+照射组的N值为1.635,D。值为1.3639Gy, Dq值为0.8661Gy, SERDO值为1.1346Gy, SERDq值为1.7728Gy, SERsF2值为1.4269Gy;顺铂+照射组的N值为1.492,D0值为1.2697Gy, Dq值为0.6247Gy,SERDo值为1.2188Gy,SERDq值为2.4578Gy,SERSF2值为1.7759Gy。结论:体外实验显示丹参素钠具有细胞毒性,在IC10浓度下对Lewis肺癌细胞具有放射增敏作用,但增敏作用与顺铂相比稍弱。