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目的:观察云木香石油醚提取物(Petroleum Ether Extract of Costusroot,PEEC)对乙醇所致胃溃疡模型大鼠的胃黏膜保护作用及其相关机制。方法:1.PEEC工艺优选以石油醚为溶剂,设计正交实验考察回流提取时间、提取温度、料液比这三个影响因素对PEEC提取工艺的影响。根据提取率、木香烃内酯含量、去氢木香内酯含量的综合评分结果优选提取物最佳提取工艺。2.PEEC对乙醇所致胃溃疡模型大鼠的胃黏膜保护作用将SD大鼠随机分为正常组、模型组、替普瑞酮组(200mg/kg)、PEEC低、中、高剂量组(12.0mg/kg、36.0mg/kg、108.0mg/kg),阳性药组和PEEC低、中、高各剂量组分别灌胃给予相应的受试药,正常组和模型组灌胃给予同体积的溶媒液作对照,1次/天,连续5天;末次给药1h后除正常组外,其余各组灌胃无水乙醇(7.5m L/kg)造模,1h后中性甲醛固定胃组织,取胃组织测量各组大鼠胃的溃疡面积、计算溃疡抑制率、进行苏木-素伊红染色(Hematoxylin and Eosin,HE)、过碘酸希夫染色(Periodic Acid Schiff reaction,PAS),以探讨PEEC对模型大鼠胃黏膜的保护作用。3.PEEC对乙醇所致胃溃疡模型大鼠的胃黏膜保护作用机制研究实验动物分组、给药、造模与第2部分相同。乙醇造模1h后,取大鼠胃组织,采用免疫组化法、ELISA法和Western Blot法检测大鼠胃组织中三叶因子1(Trefoil factor 1,TFF1)、三叶因子2(Trefoil factor 2,TFF2)、黏蛋白5AC(Mucin5AC,MUC5AC)的表达,探讨PEEC对乙醇致胃溃疡模型大鼠的胃黏膜保护作用机制。结果:1.PEEC提取工艺优选通过正交实验,根据提取率、木香烃内酯含量、去氢木香内酯含量的综合评分,得到的最佳提取工艺为提取时间0.5h,提取温度60℃,料液比为1:10。2.PEEC对乙醇所致胃溃疡模型大鼠的胃黏膜保护作用正常组大鼠胃黏膜无溃疡面,模型组大鼠胃黏膜出现溃疡面、胃黏膜有上皮脱落、水肿、出血的病理现象出现,而且黏液厚度与正常组比较明显变薄(P<0.05、P<0.01)。与模型组比较,PEEC三个剂量组能不同程度地降低溃疡面积(P<0.05、P<0.01);同时,PEEC中、高剂量组也能不同程度的减轻模型大鼠胃黏膜病理损伤、增加胃黏液层厚度(P<0.01);组间进行比较,PEEC高剂量组溃疡面积、HE病理损伤情况小于替普瑞酮组,而黏液厚度较替普瑞酮组有明显增加(P<0.01)。3.PEEC对乙醇所致胃溃疡模型大鼠的胃黏膜保护作用机制研究(1)PEEC能增强胃组织中MUC5AC、TFF1和TFF2的表达(免疫组化法)TFF1和MUC5AC蛋白表达于大鼠胃黏膜表面黏液细胞中,TFF2表达于大鼠胃黏胞膜颈黏液细胞中。与正常大鼠相比,模型大鼠胃黏膜中MUC5AC、TFF1、TFF2蛋白阳性表达减弱,光密度值下降(P<0.05);与模型组比较,替普瑞酮组、PEEC中、高剂量组大鼠胃黏膜MUC5AC、TFF1、TFF2蛋白阳性表达增强,光密度值均升高(P<0.05);其中PEEC高剂量组MUC5AC蛋白的光密度值高于比替普瑞酮组(P<0.05)。(2)PEEC能增加对胃组织中MUC5AC、TFF1和TFF2总蛋白浓度(ELISA法)与正常组比,模型组胃组织MUC5AC、TFF1、TFF2蛋白含量降低(P<0.05);与模型组比较,替普瑞酮组、PEEC中、高剂量组胃组织MUC5AC、TFF1、TFF2蛋白含量均增加(P<0.05、P<0.01);PEEC高剂量组MUC5AC蛋白含量显著高于替普瑞酮组(P<0.01)。(3)PEEC上调胃组织中MUC5AC、TFF1和TFF2的蛋白表达(Western Blot法)与正常组比,模型组胃组织MUC5AC、TFF1、TFF2蛋白表达明显降低(P<0.05);替普瑞酮组、PEEC中、高剂量组胃组织MUC5AC、TFF1、TFF2蛋白表达与模型组比较均明显升高(P<0.05);其中,PEEC中、高剂量组胃组织TFF1、TFF2蛋白表达高于替普瑞酮组(P<0.01)。PEEC低剂量组胃组织MUC5AC、TFF1、TFF2蛋白表达与模型组比无统计学意义(P>0.05)。结论:PEEC能够降低模型大鼠的胃溃疡指数、减轻胃组织病理损伤、增加大鼠胃黏液厚度,从而有效对抗乙醇导致的胃黏膜损伤,其作用机制可能与上调胃黏膜中TFF1、TFF2和MUC5AC的蛋白表达,进而增强胃黏液屏障的防御功能。