目的:研究同型半胱氨酸对体外培养的大鼠主动脉内皮细胞损伤的可能机理途径,观察叶酸、VitB₆、VitB₁₂对Hcy致内皮细胞损伤的保护作用与组合方案。方法:1. Hcy对大鼠主动脉内皮细胞的氧化应激损伤及对一氧化氮生成利用的影响原代培养鉴定大鼠主动脉内皮细胞,取对数生长期细胞按随机区组以2.0×10⁴个/ml浓度接种于96孔培养板,分5个浓度（0.01、0.1、0.5、1.0、5.0）mmol/L Hcy干预组,并设阴性对照组,共6组,各组8个复孔。采用重复测量设计观察不同浓度Hcy干预6h、12 h、24 h后,MTT法观察Hcy对内皮细胞增殖的抑制作用;分光光度比色法观察脂质过氧化指标（SOD、GSH-PX、MDA）及NO、NOS的动态变化。2. Hcy对RAEC细胞的NF-кB、VCAM-1表达及内皮-单核细胞粘附率的影响设5组,4个浓度（0.01、0.1、1.0、5.0）mmol/L Hcy干预组,一个对照组。干预24h后,免疫细胞化学法比较各组核转录子NF-кB的表达量;RT-PCR法比较各组VCAM-1mRNA表达水平;把大鼠主动脉内皮细胞与鼠单核细胞共同培养,采用考马斯亮蓝法检测粘附的单核细胞蛋白OD值,比较各组内皮-单核细胞粘附率。3.叶酸、VitB₆、VitB₁₂对Hcy致内皮细胞损伤的保护作用（1）运用L₂₇(3¹³)正交设计表,MTT法观察叶酸、VitB₆、VitB₁₂对Hcy致RAEC增殖抑制的交互保护作用,并选出三个组合方案。（2）根据正交设计结果,观察叶酸、叶酸+VitB₁₂、叶酸+VitB₁₂+VitB₆三种维生素方案对1.0mmol/L Hcy干预后致RAEC损伤的保护作用,即检测MTT、SOD、GSH-PX、MDA、NO、NOS、内皮-单核细胞粘附率、NF-кB及VCAM-1mRNA等指标的变化。