黔产瓜蒌栽培、产地加工与质量评价研究

来源 :贵阳中医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhongming328
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目的:研究黔产瓜蒌的种植栽培关键技术,优选黔产瓜蒌四种药用部位的最佳产地加工方法,提高其黔产瓜蒌的质量控制标准,在此基础上,进一步对瓜蒌的有效成分3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇在大鼠体内的药代动力学进行初步研究,考察其在大鼠体内的吸收情况。  方法:  1.以种子存活率和发芽率、药材产量和质量为评价指标,研究种子繁殖、分根繁殖、不定根繁殖、压条繁殖四种繁殖关健技术的优劣;  2.以瓜蒌皮中总多糖、总氨基酸和浸出物含量为评价指标,研究阴干法、晒干法、烘干法(30℃、40℃、50℃、60℃、70℃)不同干燥方法对瓜蒌皮质量的影响;以瓜蒌子中3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇、总氨基酸和浸出物含量为评价指标,研究阴干法、晒干法、烘干法(30℃、40℃、50℃、60℃、70℃)不同干燥方法对瓜蒌子质量的影响;以全瓜蒌中总多糖、总皂苷和浸出物含量为评价指标,研究阴干法、晒干法、烘干法(40℃、50℃、60℃、80℃、90℃)不同干燥方法对全瓜蒌质量的影响;以天花粉中总多糖、总皂苷、天花粉蛋白和浸出物含量为评价指标,研究阴干法、晒干法、烘干法(40℃、50℃、60℃、80℃、90℃)、微波干燥法(35℃、45℃、55℃、65℃)、水浸后捣碎晒干法不同干燥方法对天花粉质量的影响。采用多成分、多指标综合评分法优选瓜蒌皮、瓜蒌子、全瓜蒌、天花粉的最佳产地加工方法。  3.采用薄层色谱法、紫外分光光度法、HPLC等方法对瓜蒌皮、瓜蒌子、全瓜蒌和天花粉的质量标准进行了研究,增加了瓜蒌皮、瓜蒌子、全瓜蒌和天花粉薄层色谱法和多指标含量测定方法,建立了瓜蒌皮、瓜蒌子、全瓜蒌、天花粉的质量标准,提高其质量控制方法。  4.采用药物代谢动力学及UPLC-MS液质联用技术,研究瓜蒌子中3,29-苯甲酰基栝楼仁三醇在大鼠体内的药物代谢动力学情况。  结果:  1.黔产瓜蒌四种繁育技术的发芽率或存活率都很高,说明瓜蒌的生命力强,容易种植,对环境要求不高。具体结果为:①种子繁殖:特别是催芽繁殖出苗快,天花粉产量高,但一般2年内不开花结果,雌雄株比例不容易控制,对于生产全瓜蒌、瓜蒌皮和瓜蒌籽的生产周期较长,产量不高;②分根繁殖:出苗快,雌雄株比例可控制,坐果率高,全瓜蒌、瓜蒌皮、瓜蒌籽和天花粉产量高。③不定根繁殖:生根较快,雌雄株比例可控制,一般2年内不开花结果,对于生产全瓜蒌、瓜蒌皮和瓜蒌籽的生产周期较长,产量不高,可利用现有资源,繁育成本低。④压条繁殖:生根较快,雌雄株比例可控制,同样2年内不开花结果,全瓜蒌、瓜蒌皮、瓜蒌籽和天花粉的生产周期较长,产量不高,繁育成本低。  2.采用多指标综合评分法优选出最佳产地加工方法为:瓜蒌皮产地加工方法:取新鲜瓜蒌皮,切成1-2cm宽的长条,采用烘干法于30℃烘干,其法综合评分值最高,分值为0.94;瓜蒌子产地加工方法:取出瓜蒌子,采用烘干法于40℃烘干,其产地加工方法综合评分值最高,分值为0.89;全瓜蒌产地加工方法:取新鲜全瓜蒌,采用烘干法于60℃烘干,其综合评分值最高,分值为0.88;天花粉产地加工方法:取新鲜天花粉,除去杂质泥土,刮去外皮,切成0.5cm厚的斜片,采用微波干燥法55℃烘干,其综合评分值最高,分值为0.71。  3.黔产瓜蒌皮、瓜蒌子、全瓜蒌和天花粉质量标准研究结果:瓜蒌皮:薄层鉴别色谱图的斑点显色清晰、对应较好,专属性好,多糖含量为2.292%,精氨酸含量为12.398%;水分不得超过8.7%,总灰分不得超过4.5%,水浸出物不少于25.0%,醇浸出物不少于30.0%。瓜蒌子:薄层色谱斑点分离较好,显色清晰,方法专属性强,含三醇0.172%、氨基酸18.83%、水分不得超过7.3%,总灰分不得超过2.5%。石油醚浸出物不少于6.7%;全瓜蒌:薄层色谱斑点分离较好,显色清晰,方法专属性强,多糖含量为7.42%,皂苷含量为0.97%;水分不得超过14.75%,总灰分不得超过6.83%,瓜蒌的水浸出物不少于30.9%,醇浸出物不少于33.8%。天花粉:薄层色谱斑点分离较好,显色清晰,方法专属性强,水分不得超过8.81%、总灰分不得过3.75%、水溶性浸出物不得少于23.52%,醇浸出物不少于24.99%,多糖含量为3.393%,天花粉蛋白含量为0.381%%,皂苷含量为1.893%。  4.经模型拟合,3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇在大鼠体内的过程符合非房室模型特征,用药动分析软件DAS2.0分析药代动力学参数,得结果半衰期均值为10.095 h,达峰时间为2h,峰浓度为189.813ng·mL-1,平均驻留时间为15.263 h。  结论:  1.通过试验得出不同繁育技术方法对瓜蒌、瓜蒌皮、瓜蒌籽和天花粉的生产周期和产量均有很大的影响,种植栽培时需要结合实际需要和目的进行选择。其中分根繁殖雌雄株比例容易控制,生产周期短,产量大,但繁育成本相对较高;种子繁育技术种植成本低,对于以生产天花粉为目的种植可选择该种方法。对于不定根繁殖和压条繁殖这两种方法只适用于已有种植3年以上的企业为扩大生产规模而充分利用现有资源的方法。  2.产地加工最佳方法为:瓜蒌皮产地加工方法:取新鲜瓜蒌皮,切成1-2cm宽的长条,采用烘干法于30℃烘干;瓜蒌子产地加工方法:取出瓜蒌子,采用烘干法子40℃烘干;全瓜蒌产地加工方法:取新鲜全瓜蒌,采用烘干法于60℃烘干;天花粉产地加工方法:取新鲜天花粉,除去杂质泥土,刮去外皮,切成0.5cm厚的斜片,采用微波干燥法55℃烘干。  3.建立了黔产瓜蒌皮、瓜蒌子、全瓜蒌和天花粉质量标准,与2015年版《中国药典》一部收载的标准相比,增加了瓜蒌皮、瓜蒌子、全瓜蒌中氨基酸、多糖、皂苷等成分的含量测定;增加了天花粉多糖、皂苷的含量测定,提高了黔产瓜蒌皮、瓜蒌子、全瓜蒌和天花粉的质量控制方法。该方法简便、稳定、准确、可行,可以作为黔产瓜蒌的质量控制方法。  4.瓜蒌子中有效成分3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇在大鼠体内的半衰期为10.095 h,达峰时间为2h,峰浓度为189.813 ng·mL-1,平均驻留时间为15.263 h。
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